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基于肠道菌群-胆汁酸轴研究海藻酸钠对非酒精性脂肪性肝病的改善

效果及机制研究

摘要

非酒精性脂肪性肝病（Non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD）发病机制

复杂且尚未完全阐明，目前缺乏有效的治疗手段。海藻酸钠是存在于褐藻中的天

然的可溶性膳食纤维，具有潜在的改善肝功能、脂代谢及胰岛素敏感性的健康效

应，但尚缺乏人群研究的验证。

目的：

通过随机双盲-对照试验研究膳食补充海藻酸钠对NAFLD患者的健康效应，

并利用动物模型探明其改善NAFLD的潜在分子机制。

方法：

（1）纳入80例NAFLD志愿者，将其随机分为：海藻酸钠干预组（5g/d）

和麦芽糊精对照组（5g/d）。研究经青岛大医学部伦理委员会批准

（QDU-HEC-2022226），并在中国临床试验注册中心注册（注册号：

ChiCTR2200067065）。试验为期90天，在基线和终点采集志愿者的血清和粪便

样本，并通过3天24小时膳食回顾法评估志愿者的膳食营养素摄入情况。血清

生化指标检测包括谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、谷氨酰转移酶（GGT）、

空腹血糖（FBG）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、

低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和胰岛素。对收集的粪便进行TG和TC含量的

测定、宏基因组测序分析、代谢组学分析和相关性分析。

（2）将60只8周龄雄性C57BL/6J小鼠按体重随机分为6组（n=10）：对

照组（生理盐水）；模型组（生理盐水）；低剂量海藻酸钠组（300mg/Kg的海藻

酸钠溶液）；高剂量海藻酸钠组（600mg/Kg的海藻酸钠溶液）；菊粉组（600mg/Kg

的菊粉溶液）；阳性药物组（3mg/Kg的吡格列酮溶液）。干预8周后收集血清及

部分组织样本进行生化检测、组织学分析、肠道菌群高通量测序和代谢组学检测

分析。血清生化检测指标包括TG、TC、ALT、AST、HDL-C、LDL-C、葡萄糖、

胰岛素、成纤维细胞生长因子21（FGF-21），肝脏生化检测指标包括TG、TC、

肿瘤细胞坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β和白细胞介素（IL）-6。

（3）为明确海藻酸钠对肠道菌群的影响，将接受海藻酸钠干预的志愿者的

粪便（基线和终点）分别移植到NAFLD模型小鼠体内，设立模型组（生理盐水）、

干预前粪菌移植组（BF）和干预后粪菌移植组（AF），粪便悬浊液灌胃干预8

周后收集血清及组织样本进行生化检测（血清TG、TC、ALT、AST、HDL-C、

LDL-C、葡萄糖和肝脏TG和TC）和组织学分析。

结果：

（1）人群试验结果表明，干预组和对照组基线的人口统计学参数、人体测

量学数据和血清生化指标均无统计学差异。与对照组相比，海藻酸钠干预组志愿

者的血清TG和LDL-C浓度显著降低（P0.001），循环TC显著减少（P=0.012），

胰岛素水平显著降低（P=0.009），胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）也有改善

（P=0.035）。

（2）动物实验Ⅰ结果表明，海藻酸钠干预组小鼠体重增加量和肝重显著低

于模型组（P0.05），肝脏脂质堆积和脂肪变性情况明显好转。此外，海藻酸钠

干预组，尤其是高剂量海藻酸钠干预组小鼠的血清TG、胰岛素和HOMA-IR指

数等代谢指标显著低于模型组（P0.05）。免疫印迹结果表明，海藻酸钠干预可

显著上调肝脏脂质分解相关基因的表达并抑制脂质合成相关基因的表达。肠道菌

群的16SrRNA基因测序显示，高脂饮食会减少小鼠肠道菌群多样性，海藻酸钠

干预可改善因高脂饮食导致的肠道菌群多样性下降，并增加有益菌群的相对丰度。

（3）动物实验Ⅱ结果表明，AF组小鼠血清和肝脏脂代谢、肝功能相关指标

与模型组相比并无统计学差异，尽管肝脏脂质堆积明显减少，但定量分析无统计

学差异。

（4）人群试验粪便宏基因组测序结果表明，补充海藻酸钠后，肠道菌群的

多样性增加，与干预前相比菌群组成明显不同。基于KEGG数据库分别进行了

差异代谢物富集分析，提示海藻酸钠干预富集的代谢途径包括了次级胆汁酸的生

物合成。基于非靶向的差异代谢物分析提示干预前后胆汁酸水