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高[中生物一轮复习讲义选修1]
第31讲微生物的培养与应用
考点一培养基及微生物的纯化培养技术
1.培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配出供其生长繁殖的营养基质。
⑴营养组成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特
殊营养物质的要求。
(2)种类
①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。
③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
④下表为某微生物培养基的成分举例
KH2P。4NaHPOMgSO-7HO葡萄糖尿素琼脂HO
24422
1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g1000mL
该培养基中可以为微生物(培养基为固体
提供碳源的是葡萄糖,此:培养基,因此培养基中加入了琼脂。
2.无菌技术:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。常用方法如下图:
区别:能否杀死
|煮沸消毒法卜r全部微生)灼烧灭菌一
化学药剂消毒法卜H--1王热灭亶
11
W技术困
|紫外线消毒法]■।关।键’q高压蒸汽灭阖
防止外来杂菌的入侵
3.大肠杆菌的纯化培养
(1)备牛肉膏蛋白豚固体培养基
依据:配方比例
①计算
计算:配一定体积的培养基时,各种成分的用量
牛〔肉膏要放在称量纸上称量
②称量1
牛〔肉膏和蛋白腺都易吸潮,称取时动作要迅速,称取后及时盖上瓶盖
牛‘肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加入少量水,加热
③溶化牛肉膏溶化后取出称量纸,加入称量好的蛋白腺和氯化钠,搅拌
加入琼脂,加热使其熔化,并不断搅拌,补加蒸储水定容
灭[菌前:调节坦
U火园方[法:高压蒸汽灭菌法。压力为100kPa,温度为121℃,灭菌时间为15〜30min
倒平板应在酒精灯火焰附近
⑤倒平板甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌
.丁中的操作需要等待壬板度却赞固后才能进行
oo=
甲乙丙丁
(2)纯化大肠杆菌
①纯化培原理:想方设法在培基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的
菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤:接种。
③常用的微生物接种方法有两种
a.平板划线法:通过接种环在琼脂固体培基表面连续划线的操作,将聚
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