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蛋白质生物合成过程任务二
(一)氨基酸的活化与转运(二)多肽链的形成—核糖体循环(三)翻译后加工蛋白质生物合成过程
(一)氨基酸的活化与转运氨基酰tRNA合成酶ATPPPiH2N-CH-C-OHROH2N-CH-C-AMP-EROH2N-CH-C~O-ACC-tRNARO氨基酰tRNA合成酶高度特异性氨基酰tRNA合成酶tRNA氨基酸tRNA消耗2个高能磷酸键
(二)核糖体循环活化氨基酸在核糖体上缩合形成多肽链的过程1.起始2.肽链延长3.终止
起始阶段起始氨基酰-tRNA与mRNA结合到核糖体上,形成起始复合物的过程原料:fMet-tRNA,IF(1,2,3),GTP,Mg2+1.小亚基识别并结合mRNA30S50S50S+mRNA解聚30S小亚基识别并结合mRNA起始密码子上游10nt富含嘌呤碱基的SD序列,IF3加固这一作用。IF-1IF-3小亚基的16SrRNA3′端的UCCU序列
起始复合体大亚基mRNAMet-tRNA(fMet-tRNA)小亚基IF-1,2,3GTP
核蛋白体大小亚基分离IF-3IF-1
核蛋白体大小亚基分离
mRNA在小亚基定位结合S-D
起始氨基酰tRNA结合到小亚基S-D
核蛋白体大亚基结合形成起始复合物IF-2GDPPPiIF-3IF-1
2.fMet-tRNAfMet与小亚基结合fMetIF-2,3.大小亚基聚合IF-3GDP+Pi50S起始复合物GTPAUGAUGfMetAUGfMetAUGfMetIF-1IF-2
真核生物与原核生物核糖体循环的起始过程的不同点:1.起始Met-tRNAMet不需甲酰化;2.起始因子不少于10种;3.小亚基先与Met-tRNAMet结合,再与mRNA结合;4.ATP供能。
肽链延长阶段原料:各种氨基酰-tRNA,EF(Tu,Ts,G),GTP,Mg2+,K+。1.进位Tu-GDPGDPTsTu-TsTu-GTPGTPPiTu-GTP特异的氨基酰-tRNA进入A位pAAUGAUGTu-GTP
2.转肽Mg2+,K+转肽酶CH2CH2-CHOC=OCH-RNH2O=OCH2NCH3SAUGUAC给受OCO=R-CHNHOHCO=H3CSCH2CH2-CHNH2AUGUAC给受
3.移位OHEFG,GTPAUGA215′→3′OH21AUG5′3′AUG213AUG312AUG213进位转肽移位转肽N→C延长
通过进位-转肽-移位不断重复,肽链自N→C端不断延长OHEFG,GTPOHA每生成1个肽键,要消耗2分子GTP(进位和移位),而氨基酸活化需消耗2个高能磷酸键,每增加1个氨基酸残基实际消耗4个高能磷酸键
真核生物与原核生物核糖体循环的肽链延长阶段的不同点:1.进位时延长因子是EF-1,可分为?、?和?三类;2.移位时延长因子为EF-2,其活性可被白喉毒素抑制
进位TuTsGTP是指根据mRNA下一组遗传密码指导,使氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位
fMetGTPTuGDPTsGTPfMet
E位fMet成肽是转肽酶催化的肽键形成的过程
E位fMet转位在转位酶的作用下,消耗GTP,促进核蛋白体向mRNA的3’移动,使肽酰tRNA和mRNA相对位移进入核蛋白体P位,而卸载的tRNA进入E位
E位fMetAA3TuGTP转位
进位成肽移位消耗GTP
终止阶段RF-3:促使RF-1或RF-2从核糖体上结合真核生物仅有一个释放因子:eRF,可识别三种密码子,并需GTP参与。RF-1:UAA,UAGRF-2:UAA,UGA当mRNA的任一终止信号进入A位时,没有任何tRNA能与之识别,只有释放因子(RF)识别这种信号,进入终止阶段。
1.终止密码子的辨认RF-1或RF-2UAAOCO=R-CHAUAAOCO=R-CHUAARF
H-OH转肽酶2.肽链的水解和脱落OHRFCO=R-CHORFR-CHC-OHO=
3.tRNA、RF、mRNA的释放,核糖体大小亚基的解聚OHRF-3,IF-3EF-GRFOHRF
核糖体循环fMetAUG1.起始2.肽链延长3.终止
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