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干细胞及其应用高志买江苏银丰鼎城生物工程有限公司南京军区干细胞库

《Science》于1999年和2000年连续两次将干细胞技术评为世界十大科学成就之一干细胞技术是医学发展的未来

干细胞技术是医学发展的未来

干细胞基本知识

干细胞分类来源及功能干细胞(stemcells,SC)是指一类具有自我复制能力(self-renewing)和分化（differentiating）潜能的细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。定义：恩尼斯特·莫科洛克和詹姆士·堤尔脾脏来源细胞集落形成的发现开启了干细胞研究的大门1、BECKERAJ,?McCULLOCHEA,?TILLJE.Cytologicaldemonstrationoftheclonalnatureofspleencoloniesderivedfromtransplantedmousemarrowcells。Nature.?1963Feb2;197:452-4.2、SIMINOVITCHL,?MCCULLOCHEA,?TILLJE.THEDISTRIBUTIONOFCOLONY-FORMINGCELLSAMONGSPLEENCOLONIES.JCellPhysiol.?1963Dec;62:327-36.

胚胎干细胞根据发育过程分类人类5～6天的胚胎干细胞成体干细胞

根据功能性分类全能干细胞多功能干细胞单功能干细胞成肌细胞造血干细胞胚胎干细胞

用于临床的干细胞来源自体外周血自体骨髓胎盘及其附属物（脐带、脐血）脂肪、牙周组织

骨髓总有核细胞（NC）目前细胞治疗常用的细胞种类99从自体骨髓获得，去除大部分红细胞，剩下的全部有核细胞。其中富含各系血细胞、造血干细胞、造血各系祖细胞、血管内皮祖细胞和内皮细胞。

目前细胞治疗常用的细胞种类1010单个核细胞（MNC）从自体骨髓或异体脐血中获得，去除绝大部分红细胞、血小板、巨核细胞和多核细胞，剩下的单个核细胞。其中富含胚胎样多能干细胞、造血干细胞、造血各系祖细胞和血管内皮祖细胞。

目前细胞治疗常用的细胞种类1111123CD34+细胞（HSCEPC）从骨髓或脐血单个核细胞中经免疫磁珠法分选的表达CD34糖蛋白的细胞。其中造血干细胞和血管内皮祖细胞的纯度极高，对实验室人员操作要求较高。123

间充质干细胞（MSC）目前细胞治疗常用的细胞种类12首先分离骨髓、脐带或脂肪组织的单个核细胞，经过培养获得贴壁细胞群，呈梭形，体型较大，能分化为多种细胞。其中富含间质干细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、树突状细胞和内皮细胞。还残留少量单个核细胞。对实验室操作人员要求较高。

间充质干细胞（Mesenchymalstemcells，MSC）起源于中胚层，存在于骨髓、脐带、脐血、脂肪、乳牙组织、胎盘等，具备干细胞的自我复制和多向分化性，在发育的不同阶段和特定环境条件下，能分化为多种间质起源的组织。

国际细胞疗法间充质与组织干细胞委员会(theMesenchymalandTissueStemCellCommitteeoftheInternation2alSocietyforCellularTherapy)制定的最低标准：形态：在标准培养条件下呈贴壁生长细胞表型：表达CD105,CD73和CD90,不表达CD45,CD34,CD14或CD11b,CD79a或CD19和HLA2DR;分化功能：在体外至少能向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化。

FACS检测干细胞的免疫表型

不同来源MSC生物特性比较MSC来源取材操作细胞含量增殖分化能力免疫原性伦理争议骨髓有创，痛苦较低较低，受年龄影响较高存在脂肪有创较高较强，受年龄影响较高存在脐血无创极低较强，无年龄影响低无脐带组织无创丰富较强，无年龄影响低无

自体骨髓MSC的缺点自体骨髓MSC的优点1801取自自身，不受伦理、道德及法律方面的限制；02无HLA限制，无GVHD和HVGD；03可多向分化，在神经、心肌等细胞治疗方面具有广阔的临床前景。04可调节免疫反应，适宜于自身免疫病的调节。05过程痛苦；06老人和某些患者（如运动神经元病）无法扩增培养；07生长慢。

脐带MSC的优点19取材方便，易于收集、保存和冷冻。不受伦理、道德及法律方面的限制。由于胎血屏障，没有病毒污染，使其在神经、心肌等细胞治疗方面具有广阔的临床前景。12345人脐带MSCs不表达或低表达免疫排斥相关标记，免疫原性低，是一类免疫缺陷细胞，不须经过严格配对使用，异体移植无免疫排斥反应或反物较弱，适宜于不同个体之间的移植，是细胞治疗的理想的工具细胞。人脐带MSCs含量丰富，较为原始，分化能力强，可在体外进行分离、培养，扩增迅速，