项目5食品致病菌检验任务5.2沙门氏菌检验食品微生物检测技.pptx

项目5食品致病菌检验任务5.2沙门氏菌检验食品微生物检测技术李双石教授授课教师

任务5.2沙门氏菌检验基础知识增菌分离生化试验血清学鉴定

沙门氏菌检验方法沙门氏菌检验标准

沙门氏菌检验方法

沙门氏菌检验方法4.生化试验

沙门氏菌检验方法4.生化试验4.1三糖铁琼脂试验、赖氨酸脱羧酶试验操作：自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺；接种针不要灭菌，直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板，于(36±l)℃培养18～24h。必要时可延长至48h。

沙门氏菌检验方法①三糖铁琼脂试验

沙门氏菌检验方法②赖氨酸脱羧酶试验

沙门氏菌检验方法三糖铁琼脂赖氨酸脱羧酶试验培养基初步判断斜面底层产气硫化氢KA＋（－）＋（－）＋可疑沙门氏菌属KA＋（－）＋（－）－可疑沙门氏菌属AA＋（－）＋（－）＋可疑沙门氏菌属AA＋/－＋/－－非沙门氏菌属KK＋/－＋/－＋/－非沙门氏菌属结合TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基结果，可筛掉大部分非沙门氏菌只有斜面和底层均产酸，且赖氨酸脱羧酶阴性者才可排除为沙门菌的可能性；其余情况既可能是也可能不是沙门氏菌属的细菌注：K:产碱,A:产酸;十:阳性,一:阴性;十（一):多数阳性,少数阴性；十/一:阳性或阴性。

沙门氏菌检验方法4.2蛋白胨水（供做靛基质试验）、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时，可直接接种蛋白胨水、尿素琼脂、氰化钾培养基;也可在初步判断结果后从营养琼脂(NA)平板上挑取可疑菌落再接种这3项。(36±1)℃培养18－24h，必要时可延长至48h，判定结果。将已挑菌落的NA平板储存于2－5℃或室温至少保留24h，以备必要时复查。4.生化试验

沙门氏菌检验方法③蛋白胨水试验（靛基质试验）

沙门氏菌检验方法④尿素琼脂(pH7.2)试验

沙门氏菌检验方法⑤氰化钾(KCN)培养基试验

沙门氏菌检验方法⑤氰化钾(KCN)培养基试验氰化钾试验的安全性说明氰化钾剧毒。健康危害：抑制呼吸酶，造成细胞内窒息。吸入、口服或经皮吸收均可引起急性中毒。试验时应做好个人防护，避免接触、入口或吸入。废弃处理：灭菌后,每管加入数粒硫酸亚铁和0.5mL20%氢氧化钾溶液，然后才可清洗。

沙门氏菌检验方法4.生化试验从营养琼脂平板上挑取可疑菌落，用生理盐水制备成浊度适当的菌悬液，使用生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统进行鉴定。

沙门氏菌检验方法4.生化试验生化鉴定试剂盒

沙门氏菌检验方法4.生化试验生化鉴定试剂盒

沙门氏菌检验方法4.生化试验－结果判定反应序号硫化氢（H2S）靛基质pH7.2尿素氰化钾（KCN）赖氨酸脱羧酶结果判断A1+－－－+典型反应，判定为沙门氏菌属。如尿素、KCN和赖氨酸脱羧酶3项中有1项异常，可判定为沙门氏菌。如有2项异常为非沙门氏菌。A2++－－+补做甘露醇和山梨醇试验，沙门氏菌靛基质变体两项试验结果均为阳性，但需要结合血清学鉴定结果进行判定。A3－－－－+/-补做邻硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷（ONPG）。ONPG阴性为沙门氏菌，同时赖氨酸脱羧酶阳性，甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱羧酶阴性。注：+阳性；－阴性；+/－阳性或阴性

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