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知识点:色谱定量分析主讲：黄艳玲

—1—峰面积的测量一定量校正因子二色谱法常用的定量方法三目录页

—2—峰面积的测量1.峰高（h）乘半峰宽（W1/2）法：一般对称高斯峰的峰面积采用此法.算出的面积是实际峰面积的0.94倍：A=1.064h·W1/22.峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高0.15和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积：A=h·（W0.15+W0.85）/2

—2—峰面积的测量3.峰高乘保留时间法：在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积：A=h·b·tR

—2—定量校正因子色谱定量分析是基于被测物质的量与其峰面积的正比关系。但由于同一检测器对不同的物质具有不同的响应值，所以两个相等量的物质出的峰面积往往不相等，这样就不能用峰面积来直接计算物质的量。因此引入“定量校正因子”来校正峰面积。一定操作条件下，进样量（mi）与响应信号（峰面积Ai）成正比：

—2—定量校正因子1）绝对校正因子fi是指单位峰面积或单位峰所代表的组分的量即：：

—2—定量校正因子2.相对校正因子f’i即用标准物质为参照物，求出待测物质与标准物之间绝对校正因子的比值

—2—色谱法常用的定量方法1）归一化法当试样中所有组分均能流出色谱柱，并在检测器上都能产生信号时，可用归一化法计算组分含量。所谓归ー化法就是以样品中被测组分经校正过的峰面积(或峰高)占样品中各组分经校正过的峰面积(或峰高)的总和的比例来表示样品中各组分含量的定量方法。

—2—色谱法常用的定量方法2）外标法?外标法也称标准曲线法或直接比较法，是一种简便、快速的定量方法，与分光光度分析中的标准曲线法相似，首先用待测组分的标准样品绘制标准曲线。具体方法是:用标准样品配制成不同浓度的标准系列，在与待测组分相同的色谱条件下，等体积准确进样，测量各峰的峰面积或峰高，用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线，此标准曲线应是通过原点的直线。

—2—色谱法常用的定量方法3）内标法?若试样中所有组分不能全部出峰，或只要求测定试样中某个或某几个组分的含量时，可以采用内标法定量。所谓内标法就是将一定量选定的标准物(称内标物S)加入到一定量试样中，混合均匀后，在一定操作条件下注入色谱仪，出峰后分别测量组分i和内标物S的峰面积(或峰高)计算组分i的含量。

—2—色谱法常用的定量方法4）标准加入法标准加入法实质上是一种特殊的内标法，是在选择不到合适的内标物时，以待测组分的纯物质为内标物，加入到待测样品中，然后在相同的色谱条件下，测定加入前后待测组分的峰面积（或峰高），从而计算待测组分在样品中的含量的方法。以峰面积计算方法为例，公式如下：

定量方法特点归一化法操作条件、进样量不要求严格控制；必须保证试样中各个组分全部出峰外标法不用校正因子；严格控制操作条件，试样、标样的进样量须相等；适合大批量试样的快速分析内标法不要求所有组分全部出峰；操作条件，进样量不要求严格控制；准确度高，但是内标物选择复杂。标准加入法只需要待测组分的纯物质，色谱操作条件要求严格

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