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核酸检测pcr考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性B.复性C.延伸D.转录

2.用于PCR反应的酶是（）

A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.限制性内切酶D.连接酶

3.PCR反应体系中不需要的成分是（）

A.引物B.dNTPC.模板DNAD.核糖体

4.引物设计的原则不包括（）

A.长度适宜B.避免互补C.GC含量高D.特异性强

5.以下哪种情况会导致PCR假阳性结果（）

A.模板量不足B.引物浓度过低C.污染D.退火温度过高

6.PCR技术的发明人是（）

A.孟德尔B.桑格C.穆利斯D.沃森

7.一般PCR反应的循环次数是（）

A.10-15次B.15-20次C.25-35次D.40-50次

8.退火温度一般比引物的Tm值低（）

A.1-2℃B.3-5℃C.5-10℃D.10-15℃

9.PCR产物分析最常用的方法是（）

A.凝胶电泳B.高效液相色谱C.质谱分析D.比色法

10.以下哪种物质可抑制PCR反应（）

A.甘油B.乙醇C.肝素D.葡萄糖

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的特点有（）

A.灵敏度高B.特异性强C.快速D.简便E.可扩增特定基因片段

2.引物设计时需要考虑的因素有（）

A.长度B.碱基组成C.特异性D.引物二聚体E.Tm值

3.PCR反应体系的成分包括（）

A.模板DNAB.引物C.dNTPD.DNA聚合酶E.缓冲液

4.可能导致PCR扩增失败的原因有（）

A.模板质量差B.引物设计不合理C.反应条件不合适D.酶活性丧失E.污染

5.提高PCR特异性的方法有（）

A.优化引物设计B.调整反应条件C.采用热启动PCRD.增加模板量E.减少dNTP浓度

6.PCR技术在以下哪些领域有应用（）

A.疾病诊断B.基因克隆C.法医鉴定D.物种鉴定E.药物研发

7.影响PCR反应的因素包括（）

A.温度B.时间C.循环次数D.各成分浓度E.仪器性能

8.常用的DNA聚合酶有（）

A.TaqDNA聚合酶B.PfuDNA聚合酶C.Klenow片段D.T4DNA聚合酶E.VentDNA聚合酶

9.以下关于PCR产物回收的说法正确的是（）

A.可用于后续克隆B.常用凝胶回收方法C.回收效率可能受多种因素影响D.可去除杂质E.回收的产物可直接用于测序

10.热启动PCR的优点有（）

A.减少非特异性扩增B.提高扩增效率C.增加产物特异性D.降低引物二聚体形成E.缩短反应时间

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR可以扩增任何长度的DNA片段。（）

2.引物的长度越长，PCR反应的特异性越好。（）

3.dNTP的浓度过高会导致PCR反应出错率增加。（）

4.退火温度越高，PCR反应的特异性越低。（）

5.模板DNA的纯度对PCR反应结果没有影响。（）

6.PCR反应中DNA聚合酶只能从5端向3端延伸DNA链。（）

7.只要引物设计正确，PCR反应就一定能成功。（）

8.循环次数越多，PCR产物的量一定越多。（）

9.不同的DNA聚合酶具有相同的保真性。（）

10.PCR产物可以直接用于基因表达分析。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本原理。

答案：PCR是体外模拟体内DNA复制过程。在高温下模板DNA变性解链，低温时引物与模板退火结合，适温下DNA聚合酶以dNTP为原料，从引物3端延伸合成新的DNA链，经多轮循环扩增目的片段。

2.引物设计的基本要求有哪些？

答案：长度一般18-25bp；GC含量40%-60%；避免自身互补及引物二聚体形成；具有特异性，与模板结合的Tm值在55-65℃。

3.简述