第四章紫外可见分光光度法 (2).pptVIP

四、光的吸收定律PrinciplesofOpticalAbsorption（一）吸收光谱法基本定律--朗伯-比尔定律(Lamber-BeerLaw)描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系。第28页，共74页，星期日，2025年，2月5日被吸收光强度为IaI0=Ia+It+IrI0IrIt待测溶液和参比溶液使用同样的吸收池，反射光强度基本相同，影响抵消：I0=Ia+It透光度和吸光度第29页，共74页，星期日，2025年，2月5日定义：透光度（或透光率）T为因此：T↗、吸收↘定义：吸光度A第30页，共74页，星期日，2025年，2月5日----朗伯-比尔定律b----比色池的厚度c----溶液的浓度

k----吸光系数在设定条件为：（1）单色、平行光，垂直照射（2）溶液透明均匀:浓度均一（C=const.）溶液的吸光度A只与溶液的浓度和溶液的厚度有关。朗伯-比尔定律kbcTA=-=log第31页，共74页，星期日，2025年，2月5日物理意义：吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度。讨论：①k=f（组分性质，温度，溶剂，λ）当组分性质、温度和溶剂一定，k=f（λ）②不同物质在同一波长下k可能不同（选择性吸收）；同一物质在不同波长下k一定不同吸光系数（AbsorptivityandSpectrometry）吸光系数（k）第32页，共74页，星期日，2025年，2月5日③k↑，物质对光吸收能力↑,定量测定灵敏度↑定性、定量依据（1）摩尔吸光系数ε：在一定λ下，C=1mol.L-1，l=1cm时的吸光度（2）百分含量吸光系数/比吸光系数：在一定λ下，C=1g/100ml，l=1cm时的吸光度（3）两者关系吸光系数（k）的两种表示方式第33页，共74页，星期日，2025年，2月5日（二）偏离比尔定律的因素ElementsofdeviatedBeerLaw按照比尔定律，吸光度（A）与浓度（c）关系应该是过原点的直线。Ac负偏离正偏离偏离Beer定律的主要因素表现为以下两个方面：光学因素化学因素第34页，共74页，星期日，2025年，2月5日1.光学因素（1）非单色光Beer定律成立的重要前提—入射光为单色光ΔA1ΔA2相同的Δλ，但ΔA1ΔλΔλΔA2Aλ第35页，共74页，星期日，2025年，2月5日照射物质的光经单色器分光后非真正单色光其波长宽度由入射狭缝的宽度和棱镜或光栅的分辨率决定为了保证透过光对检测器的响应，必须保证一定的狭缝宽度这就使分离出来的光具一定的谱带宽度非单色光的原因:第36页，共74页，星期日，2025年，2月5日选择较纯单色光（Δλ↓，单色性↑）选λmax作为测定波长（ΔA↓，灵敏度S↑且成线性）结论第37页，共74页，星期日，2025年，2月5日2.化学因素Beer定律适用的另一个前提：稀溶液浓度过高会使C与A关系偏离定律溶质因解离、缔合以及与溶剂作用偏离定律Cr2O72-+H2O?2H++2CrO42-例如：第38页，共74页，星期日，2025年，2月5日3.反射光和散射光的影响反射光和散色光均是入射光谱带宽度内的光直接对T产生影响。散射和反射使T↓，A↑，吸收光谱变形注：一般可用空白对比校正消除4.非平行光的影响使光程↑，A↑，吸收光谱变形第39页，共74页，星期日，2025年，2月5日第二节紫外-可见分光度计紫外-可见分光光度计第40页，共74页，星期日，2025年，2月5日光源单色器吸收池检测器信号处理及显示器紫外-可见分光光度计的基本组成模块（generalprocess）一、分光光度计的主要部件

MajorComponentsofspectrometer第41页，共74页，星期日，2025年，2月5日在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。1.光源可见光区：钨灯或卤钨灯作