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生物化学实验操作考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.下列哪种试剂可用于蛋白质的定量测定，且原理是基于蛋白质中的肽键与铜离子在碱性条件下形成紫色络合物？

A.双缩脲试剂

B.考马斯亮蓝试剂

C.茚三酮试剂

D.斐林试剂

答案：A

解析：双缩脲试剂与蛋白质中的肽键在碱性条件下反应，生成紫色络合物，可用于蛋白质的定量测定。考马斯亮蓝试剂是通过与蛋白质结合使溶液颜色变化来测定蛋白质含量；茚三酮主要用于检测氨基酸；斐林试剂用于检测还原糖。

2.在DNA提取实验中，使用乙醇沉淀DNA的原理是：

A.乙醇可以使DNA变性

B.乙醇降低了DNA的溶解度

C.乙醇可以去除蛋白质杂质

D.乙醇可以破坏细胞膜

答案：B

解析：在DNA提取中，乙醇能降低DNA在溶液中的溶解度，使DNA从溶液中沉淀出来。乙醇不会使DNA变性，去除蛋白质杂质一般用蛋白酶K等；破坏细胞膜常用洗涤剂等。

3.进行酶活性测定时，为了保证反应体系中底物浓度远大于酶浓度，通常底物浓度应是酶浓度的：

A.10倍以上

B.50倍以上

C.100倍以上

D.200倍以上

答案：C

解析：在酶活性测定中，为了使酶促反应速率与酶浓度成正比，底物浓度应远大于酶浓度，一般要求底物浓度是酶浓度的100倍以上。

4.在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中，分离胶和浓缩胶的缓冲液pH不同，分离胶的pH一般为：

A.6.8

B.7.4

C.8.8

D.9.6

答案：C

解析：在PAGE中，浓缩胶的pH为6.8，分离胶的pH为8.8。不同的pH环境有助于蛋白质在电泳过程中更好地分离。

5.测定蛋白质分子量常用的方法是：

A.离子交换色谱

B.凝胶过滤色谱

C.亲和色谱

D.吸附色谱

答案：B

解析：凝胶过滤色谱是根据蛋白质分子大小进行分离的，可用于测定蛋白质的分子量。离子交换色谱主要根据蛋白质的电荷性质分离；亲和色谱是基于蛋白质与配体的特异性结合；吸附色谱是利用吸附剂对不同物质的吸附能力差异进行分离。

6.在分光光度法测定物质含量时，选择合适的波长是根据：

A.物质的最大吸收波长

B.物质的最小吸收波长

C.任意波长

D.仪器的工作波长范围

答案：A

解析：在分光光度法中，为了获得最高的灵敏度和准确性，通常选择物质的最大吸收波长进行测定。

7.在制备固定化酶时，下列哪种方法不属于共价结合法？

A.重氮法

B.交联法

C.戊二醛法

D.物理吸附法

答案：D

解析：重氮法、交联法、戊二醛法都属于共价结合法，是将酶通过共价键结合到载体上。物理吸附法是利用吸附作用将酶固定在载体上，不属于共价结合法。

8.在血糖测定实验中，常用的葡萄糖氧化酶法测定的是：

A.血液中所有糖类的含量

B.血液中葡萄糖的含量

C.血液中还原糖的含量

D.血液中蔗糖的含量

答案：B

解析：葡萄糖氧化酶法具有高度的特异性，只能催化葡萄糖氧化，因此该方法测定的是血液中葡萄糖的含量。

9.在蛋白质的等电点测定实验中，当蛋白质溶液的pH等于其等电点时，蛋白质的：

A.溶解度最大

B.溶解度最小

C.电荷最多

D.稳定性最好

答案：B

解析：当蛋白质溶液的pH等于其等电点时，蛋白质分子的净电荷为零，此时蛋白质分子间的静电斥力最小，溶解度最小。

10.在核酸的紫外吸收测定中，核酸在波长多少处有特征性的吸收峰？

A.220nm

B.260nm

C.280nm

D.320nm

答案：B

解析：核酸中的嘌呤和嘧啶碱基具有共轭双键，在260nm处有特征性的吸收峰，可用于核酸的定量测定。

11.在提取植物色素时，常用的提取溶剂是：

A.水

B.乙醇

C.石油醚

D.以上都是

答案：D

解析：不同的植物色素具有不同的溶解性，水可提取水溶性色素，乙醇可提取一些醇溶性色素，石油醚可提取脂溶性色素，所以以上溶剂都可用于植物色素的提取。

12.在蛋白质的盐析实验中，常用的盐是：

A.氯化钠

B.硫酸钠

C.硫酸铵

D.碳酸钠

答案：C

解析：硫酸铵是蛋白质盐析实验中最常用的盐，它具有溶解度大、对蛋白质的变性作用小等优点。

13.在酶的米氏常数（Km）测定实验中，双倒数作图法是将1/v对1/[S]作图，所得直线在横轴上的截距为：

A.-1/Km

B.1/Km

C.-Km

D.Km

答案：A

解析：双倒数作图法（Lineweaver-Burk作图法）中，直线方程为1/v=(Km/Vmax)×(1/[S])+1/Vmax，在横轴上的截距为-1/Km。

14.在SDS-PAGE实验中，SDS的作用是：