耐药结核病诊断新技术.pptVIP

乙胺丁醇链霉素氟喹诺酮每个突变都表现出特有的谱线对应独特的熔点,软件可以自动地给出突变类型,即使发生不均一突变的情况,也可以分辨出来.第31页，共37页，星期日，2025年，2月5日步骤二加入1-96个提取样本到检测管中步骤三集成多重PCR和结果自动报告步骤一自动提取1-24份样本操作流程总耗时约3小时，手工操作时间约15分钟第32页，共37页，星期日，2025年，2月5日第1页，共37页，星期日，2025年，2月5日主要内容一、概述二、基因芯片技术三、熔解曲线技术第2页，共37页，星期日，2025年，2月5日全球范围内结核病疫情严重患病率高：新发患者1040万/年，其中有120万（11%）HIV患者；死亡率高：每年死亡人数达140万（13.46%），HIV/TB:死亡人数40万（33.33%）；耐药率高：48万新发的MDR-TB病例和10万耐利福平结核病（RR-TB）病例；接受MDR检测、报告和治疗的MDR-TB不足1/3，接受治疗的MDR-TB治愈成功率只有50%2016年全球结核病报告第3页，共37页，星期日，2025年，2月5日第4页，共37页，星期日，2025年，2月5日2015年全球估计MDR-TB患者数第5页，共37页，星期日，2025年，2月5日结核病快速及时诊断是结核病防控

重要因素第6页，共37页，星期日，2025年，2月5日灵敏准确操作简便检测时间短闭管检测检测位点全面对新型耐药检测技术的要求第7页，共37页，星期日，2025年，2月5日第8页，共37页，星期日，2025年，2月5日基因芯片技术第9页，共37页，星期日，2025年，2月5日结核病耐药与基因64-68%rpsL基因突变70%embB基因突变70%65%耐药基因93%95%95%rpoB基因突变利福平异烟肼50-70%katG基因突变5-10%inhA基因突变6-13%ahpC基因启动子区域突变链霉素乙胺丁醇多数研究报告提示：耐药的发生与结核杆菌的基因突变有关。总体上是基因一个或几个核苷酸突变（表现增加、缺失、替代），造成核苷酸编码错误致氨基酸错位排列，影响药物与靶位酶结合产生耐药第10页，共37页，星期日，2025年，2月5日第11页，共37页，星期日，2025年，2月5日基因芯片（原理）激光共焦扫描仪软件判读样品制备仪杂交仪基因芯片方法是基于结核杆菌的利福平和异烟肼耐药性相关的rpoB/katG/inhA的基因位点发生突变，通过PCR扩增、和固定于尼龙膜上的寡核苷酸探针进行杂交、扫描，检测荧光信号的有无，判断特定位点的突变情况和结核菌耐药性。基因芯片仪和试剂获国家SFDA和欧盟CE认证*第12页，共37页，星期日，2025年，2月5日基因芯片法第13页，共37页，星期日，2025年，2月5日第14页，共37页，星期日，2025年，2月5日利福平的耐药位点第15页，共37页，星期日，2025年，2月5日MSM耻垢分枝杆菌MTC结核分枝杆菌复合群MTR次要分枝杆菌MIN胞内分枝杆菌MAV鸟分枝杆菌MGA胃分枝杆菌MKA堪萨斯分枝杆菌MSC瘰疠分枝杆菌MUA母牛分枝杆菌MCH龟分枝杆菌龟亚种MAB龟分枝杆菌脓肿亚种MSZ苏尔加分枝杆菌MMA海/溃疡分枝杆菌MXE蟾蜍分枝杆菌MDI迪氏分枝杆菌MFO偶发/猪分枝杆菌MGI浅黄分枝杆菌MSI猿猴分枝杆菌MTE土分枝杆菌MPH草分枝杆菌CC质控点MNO不产色分枝杆菌MGO戈登分枝杆菌同时鉴定MTC与21种NTM第16页，共37页，星期日，2025年，2月5日非结核分枝杆菌第17页，共37页，星期日，2025年，2月5日在国内4个省的4个地市级CDC进行了评估。第18页，共37页，星期日，2025年，2月5日结核病和非结核的诊断第19页，共37页，星期日，2025年，2月5日特点标本：菌株、涂阳痰标本时间：约8小时优点：高通量灵敏度、特异度高第20页，共37页，星期日，2025年，2月5日国家结核病参比实验室推荐建议基因芯片可以用于:可疑耐药结核病患者筛查,它有望代替利福平和异烟肼的传统药敏试验推荐理由:在我国获得注册证书；国内研究显示其敏感性和特异性较好；民族品牌数据显示在我国具有可行性,符合成本效果；可能