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2020北京PCR考试试题及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性B.复性C.延伸D.转录

2.Taq酶的特点是（）

A.耐高温B.耐低温C.催化效率低D.特异性差

3.PCR引物设计时，一般长度为（）

A.10-15bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp

4.以下哪种物质不是PCR反应必需的（）

A.dNTPB.Mg2?C.模板DNAD.限制性内切酶

5.PCR技术的发明人是（）

A.克里克B.沃森C.穆利斯D.桑格

6.提高PCR反应特异性的方法不包括（）

A.优化引物设计B.提高退火温度C.增加模板量D.使用热启动Taq酶

7.PCR反应体系中，模板DNA的量一般为（）

A.1-10ngB.10-100ngC.100-1000ngD.1μg以上

8.用于检测PCR产物的常用方法是（）

A.凝胶电泳B.离心C.过滤D.透析

9.下列关于PCR循环数的说法正确的是（）

A.循环数越多越好B.循环数一般25-35次

C.循环数与产物量无关D.循环数固定为20次

10.PCR反应的缓冲液主要作用是（）

A.提供能量B.维持合适的pH和离子强度

C.溶解引物D.保护Taq酶

答案：1.D2.A3.B4.D5.C6.C7.B8.A9.B10.B

多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的应用领域包括（）

A.基因诊断B.基因克隆C.法医鉴定D.疾病治疗

2.影响PCR反应的因素有（）

A.引物质量B.Taq酶活性C.模板纯度D.反应温度

3.设计PCR引物时需要考虑的因素有（）

A.引物的长度B.引物的GC含量C.引物的特异性D.引物二聚体形成

4.以下属于PCR反应体系成分的有（）

A.引物B.Taq酶C.dNTPD.模板DNA

5.PCR产物可能出现的问题有（）

A.非特异性扩增B.引物二聚体C.产量过低D.碱基错配

6.提高PCR反应效率的方法有（）

A.优化反应体系B.选择合适的引物C.提高模板浓度D.调整反应程序

7.实时荧光定量PCR的应用有（）

A.基因表达定量分析B.病原体核酸定量检测

C.单核苷酸多态性分析D.甲基化分析

8.普通PCR与实时荧光定量PCR的区别在于（）

A.检测方法B.反应原理C.应用目的D.反应体系

9.用于PCR反应的模板DNA可以来源于（）

A.基因组DNAB.cDNAC.线粒体DNAD.质粒DNA

10.下列关于PCR技术特点的描述正确的有（）

A.灵敏度高B.特异性强C.快速高效D.操作简单

答案：1.ABC2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.ABD7.AB8.AC9.ABCD10.ABCD

判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，退火温度越高越好。（）

2.Taq酶没有3→5外切酶活性，因此保真性较差。（）

3.引物的特异性决定了PCR反应的特异性。（）

4.增加dNTP的浓度可以提高PCR反应的产量。（）

5.PCR反应可以扩增任意长度的DNA片段。（）

6.实时荧光定量PCR可以直接测定模板DNA的初始浓度。（）

7.模板DNA的质量对PCR反应结果没有影响。（）

8.PCR技术只能用于扩增已知序列的DNA片段。（）

9.热启动Taq酶可以提高PCR反应的特异性。（）

10.PCR反应体系中的Mg2?浓度不影响反应结果。（）

答案：1.×2.√3.√4.×5.×6.√7.×8.×9.√10.×

简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本原理。

答案：PCR基于DNA半保留复制原理，通过高温变性使