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2025-07-23 发布于北京
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自然生物技术提前基因1 nbt 3753.pdf

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CORRESPONDENCE

Failuretodetect-guidedgenomeeditingusing

NatronobacteriumgregoryiArgonaute

TotheEditor:EGFPmarkergeneinhumanU2OScellshypothesisis“NgAgodoesnotinduceindels

-guidedcleavageusingusingeithertheNgAgo-encodingplasmidinhumancellsatorgreaterthantherateof

Argonaute-familyproteinswaspreviouslyobtainedfromAddgeneoranotherplasmid,0.20.”Theprobabilityofusnotobserving

reportedbutoflimitedpracticalutilityduegeneratedbysubcloningtheNgAgoanyevidenceofindelsaftertesting45

totherequirementforsupraphysiologicalsequenceinamlianexpressionvectortsamplesisp=0.845=4.4×

conditions,suchashightemperature1,2.(SupplementaryFig.1b,c).Incontrast,10(–5).Inaddition,parallelsequenceanalysis

Recently,Gaoetal.3reportedanArgonautecellstransfectedwithplasmidsencodinganof45subclonedcoloniesfromHeLacell

proteinisolatedfromNatronobacteriumRNA-guidednucleasebasedonStreptococcussamplesalsofailedtoshowanyevidenceof

gregoryi(NgAgo)asagenomeengineeringpyogenesCas9(SpCas9)andaspecificgRNAindels(datanotshown).Theset

toolforeditingthehumangenome.AfterdecreasedEGFPexpression14-foldinthereplicatesfailedtodetectanyNgAgo-

transfectinghumancelllineswithaplasmidepisomalassayinHeLaandHEK293T

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