生产菌种的培养与保存.pptVIP

2.种子质量的控制指标菌体的形态碳、氮、磷的代谢情况菌株的生产能力特殊酶活力第30页，共48页，星期日，2025年，2月5日3.种子异常分析菌丝生长过慢：培养基质量不好；灭菌质量不好；通入空气的温度过低菌丝结团：接种量小；培养基粘度不当；搅拌不好菌丝粘壁：搅拌不好；装料系数少；泡沫多第31页，共48页，星期日，2025年，2月5日第三节生产菌种的保藏一、微生物菌种的保藏要求要求：①是广泛收集各种研究、教学和生产性菌种，满足各方面需求；②高质量保藏，即要求保藏的菌种不死亡、活性不衰老、特性不变异、分类不紊乱；③随时可提供保持有原始特性的菌种用于交换和使用。第32页，共48页，星期日，2025年，2月5日二、菌种保藏原理原理：将微生物菌种保存在不利于微生物活跃生长和代谢的不良环境中，如干燥、低温、缺氧、黑暗、营养饥饿等等，使微生物代谢速率极为缓慢或处于休眠状态。而一旦恢复所保存菌种生长的正常环境和营养条件，即可获得具有高生理活性和保持原种优良性状的菌种培养物。第33页，共48页，星期日，2025年，2月5日三、微生物菌种保藏的常用方法菌种保藏的方法有多种多样，常用方法简介如下：1、斜面低温保藏法2、?液体石蜡封藏法3、?沙土管保藏法4、甘油低温保存法5、真空冷冻干燥保藏法6、液氮超低温保藏法

第34页，共48页，星期日，2025年，2月5日1、斜面低温保藏法4℃保存，1~3月2、?液体石蜡封藏法石蜡→灭菌→冷却→加入试管中第35页，共48页，星期日，2025年，2月5日3、?沙土管保藏法1mol/L酸洗→1mol/L碱洗→蒸馏水洗→烘干→过筛→混合（3：2或1：1）→分装沙土管→干接法：接孢子后，低温抽真空湿接法：接孢子悬液后，低温抽真空取沙取土（沙:20~40目）（土:40~60目）第36页，共48页，星期日，2025年，2月5日第1页，共48页，星期日，2025年，2月5日第一节生产菌种的制备过程菌种→母斜面→子斜面→摇瓶菌丝→种子罐→发酵罐第2页，共48页，星期日，2025年，2月5日实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此现象地将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工程归为发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。第3页，共48页，星期日，2025年，2月5日种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。第4页，共48页，星期日，2025年，2月5日种子扩培的目的接种量的需要菌种的驯化缩短发酵时间、保证生产水平种子的要求：总量及浓度能满足要求生理状况稳定，个体与群体活力强，移种至发酵后，能够迅速生长无杂菌污染第5页，共48页，星期日，2025年，2月5日一、孢子的制备放线菌孢子的制备：营养要求：营养物质含量要低，特别是氮源培养基：琼脂斜面培养基培养温度：28~37℃培养时间：5~14天斜面含水量：低第6页，共48页，星期日，2025年，2月5日棒状链霉菌成熟单菌落生长丰满，紧密，菌落呈草帽形，中间突起，气生菌丝颜色为白色，基内菌丝由浅黄到灰黄，都不产生可溶性色素，孢子为暗灰绿色，成熟后，孢子易于刮下棒状链霉菌出发菌株单菌落形态特征第7页，共48页，星期日，2025年，2月5日棒状链霉菌斜面一般培养四到五天左右产生孢子，六到七天斜面孢子生长成熟，气生菌丝颜色为白色，基内菌丝由浅黄到灰黄，都不产生可溶性色素，孢子呈暗灰绿色棒状链霉菌出发菌株的斜面培养特征第8页，共48页，星期日，2025年，2月5日霉菌孢子的制备：营养要求：碳、氮含量要低，无机盐适量培养基：天然农产品培养温度：25~28℃培养时间：4~14天第9页，共48页，星期日，2