畜牧学通论第二章繁殖学.pptVIP

*****************************************************************第六节动物繁殖的生物技术三、配子与胚胎工程配子与胚胎工程是指对精子、卵子和胚胎在体外条件下进行的各种操作和处理。包括冷冻精液、卵子的培养和体外受精、性别鉴定、胚胎冷冻、胚胎嵌合、克隆、基因导入、胚胎干细胞等。第126页，共142页，星期日，2025年，2月5日第六节动物繁殖的生物技术（一）冷冻精液：利用液氮（-196℃）或干冰（-79℃）或其它制冷设备为冷源，将采取的新鲜精液经过特殊处理，保存在超低温的环境下，以达到长期保存的目的。（二）卵子培养：从卵巢上的囊状卵泡或成熟卵泡吸取尚处于第一次成熟分裂前期或成熟分裂复始的卵母细胞连同完整健全的卵丘细胞团，在特定培养液中使其继续发育，进行成熟分裂，达到可以受精的成熟阶段。卵子培养是在体外成熟的过程，为得到丰富胚胎开辟了新的途径。第127页，共142页，星期日，2025年，2月5日第六节动物繁殖的生物技术（三）体外受精—试管动物：通过人为操作使精子和卵子在体外环境中完成受精过程。体外受精技术包括卵母细胞的采集、体外成熟，精子的体外获能，成熟卵母细胞与获能精子的体外受精，受精卵的早期体外培养和移植等一系列步骤。体外受精技术可获得大量胚胎，试管胚胎生产“工厂化”，不仅在畜牧生产具有广阔应用前景，而且在医学上可以治疗不孕症，同时对于丰富受精生物学的基础理论也有重大意义。第128页，共142页，星期日，2025年，2月5日第六节动物繁殖的生物技术（四）胚胎性别鉴定：人为方法对胚胎性别进行鉴定，选择(淘汰)某一性别的胚胎，预知所生动物性别。1.细胞学方法：通过核型分析对胚胎性别进行鉴定,准确率高，但胚胎浪费大，耗时费力，难以在生产中应用。2.免疫学方法：利用H-Y抗血清或H-Y单克隆抗体检测胚胎上是否存在雄性特异性H-Y抗原，鉴定胚胎性别的一种方法。此法对牛、猪和绵羊的雌性鉴定准确率分别为89％、81％和85％。第129页，共142页，星期日，2025年，2月5日第六节动物繁殖的生物技术3.分子生物学方法利用雄性特异性基因探针和PCR扩增技术鉴别家畜胚胎性别的新方法。这种方法灵敏度高，准确率达90％以上，对胚胎损伤极小，∴被国内外研究人员广泛用于家畜，尤其是牛胚胎性别鉴定，是目前较为成熟、最理想的胚胎性别鉴定方法。Sinclair等(1990)、Gubbay等(1990)和Koopmans等(1991)发现了哺乳动物的性别决定基因SRY，用PCR技术来检测SRY基因的有无便可判别胚胎性别，为胚胎性别鉴定提供了更可靠的保证。第130页，共142页，星期日，2025年，2月5日（五）胚胎冷冻保存：采取特殊的保护措施和降温程序，一般指在干冰(-79℃)和液氮(-196℃)中保存胚胎。使胚胎在低温的条件下停止代谢，而升温后又恢复活力的一种长期保存胚胎的技术。这一技术为建立优良品种的胚胎库或基因库提供了条件，可使因疾病或其他原因丢失的各种动物品种、品系和稀有突变体得以保持。第六节动物繁殖的生物技术第131页，共142页，星期日，2025年，2月5日第六节动物繁殖的生物技术1.意义胚胎冷冻保存可以使胚胎移植不受时间、地域的限制，利于胚胎移植的推广应用，是使该技术实现商品化的关键因素。可以利用此项技术建立良种家畜和濒危动物的胚胎库。可解决国内外胚胎远距离运输，促进国际间良种交换，加快育种进程。可防止由于疾病、战争或其它原因造成的各种动物品系和稀有突变体的丢失。第132页，共142页，星期日，2025年，2月5日第六节动物繁殖的生物技术2.方法逐步降温法（快冻快解法）：这是一种传统方法，家畜胚胎冷冻最初获成功大都是用此法取得的。解冻后胚胎存活率较高，但操作程序比较复杂。一步细管法：在细管内用非渗透性蔗糖溶液一步脱除抗冻剂（甘油）的方法。抗冻剂在急剧降到很低温度时，能被浓缩但不结晶，且黏滞性增加，形成玻璃化。用这种方法冷冻，胚胎内外液体能同时玻璃化，不会形成冰晶，这样能较好地保护胚胎。玻璃化冷冻的优点是无需冻前分步添加和冻后分步脱除抗冻剂的操作，省去了费时费力的降温操作，也不需要昂贵的冷冻设备—冷冻仪。第133页，共142页，星期日，2025年，2月5日第六节动物繁殖的生物技术（六）胚胎分割通过对胚胎的显微操作，人为制造同卵双胎或多胎的方法。1.意义通过胚胎分割可以增加良种胚胎的