柠檬酸发酵工艺.pptVIP

（三）其他处理法先用含盐酸的磷酸三钙处理，再用葡聚糖处理甘蔗糖蜜，能获得很好的效果。用酸（硫酸或磷酸）和碱（石灰乳）交替处理，可以除去糖蜜中可沉淀物质。这些方法都有利于提高柠檬酸的产酸水平。第31页，共86页，星期日，2025年，2月5日

第二节柠檬酸深层发酵工艺

一、黑曲霉柠檬酸发酵条件控制1·营养要求2·温度控制3·PH控制4·接种量和方式5·溶氧量的控制第32页，共86页，星期日，2025年，2月5日(一)营养要求黑曲霉柠檬酸生产菌是化能异养微生物，只能利用有机碳源；要使黑曲霉柠檬酸产生菌大量生成和积累柠檬酸，必须控制营养物质的供给，使菌体生长受限制，处于半“饥饿”和代谢失调状态。依据柠檬酸发酵机制，黑曲霉大量生成和积累柠檬酸的基本条件，是提供高浓度的葡萄糖和充足的氧。第33页，共86页，星期日，2025年，2月5日碳源碳源除了合成细胞物质和提供维持生命活动的能量外，主要用于合成代谢产物。从柠檬酸生产角度看，葡萄糖、蔗糖、糊精是良好的碳源，高糖浓度是柠檬酸发酵的一大特征。工业上为降低生产成本，多采用廉价的甘薯、玉米、小麦及其淀粉、糖蜜等。第34页，共86页，星期日，2025年，2月5日氮源氮源的作用是合成细胞物质和代谢调节，这是因为细胞中铵离子浓度的升高，能解除ATP和柠檬酸对关键酶磷酸果糖激酶的反馈抑制，使EMP代谢流增强，有利于柠檬酸生成与积累。一般柠檬酸发酵采用的氮源有：（1）生理酸性氮：（NH4)2SO4、（NH4)3PO4、NH4Cl、（NH4)2CO3等；（2）生理碱性氮：Ca（NO3）2、Mg（NO3）2、NaNO3、KNO3等；（3）两性氮：NH4NO3;(4)有机氮：麸皮、米糠、蛋白胨、氨基酸、尿素等。第35页，共86页，星期日，2025年，2月5日当有机氮和无机氮同时存在时，黑曲霉首先利用无机氮；在无机氮中，黑曲霉偏好生理酸性无机氮，这是因为生理酸性氮中的铵离子被利用后，使培养基变酸，可以使发酵中的黑曲霉生长阶段结束，进入产酸阶段，PH下降到较低水平有利于柠檬酸的积累；所以铵盐既可以调节代谢，也可以控制pH。如果原料中有机氮含量过分丰富，菌生长代谢加快，对缩短发酵周期有利。但是不利于柠檬酸积累、产酸率不高。这就是不能利用含蛋白质丰富的粗玉米粉直接发酵的原因。第36页，共86页，星期日，2025年，2月5日无机盐无机盐是构成微生物生命活动不可缺少的物质。在柠檬酸发酵中，有的构成菌体，有的促进代谢，有的促进产酸等，因此对黑曲霉的生长和柠檬酸发酵具有重要的作用。无机盐对柠檬酸发酵影响是十分复杂的，它因菌种、原料、生产方式不同而不同。第37页，共86页，星期日，2025年，2月5日(二)温度控制黑曲霉属嗜热微生物，最适生长温度为33～37℃。一般认为，深层液体发酵中，温度低于28℃，导致长菌和产酸缓慢；高于37℃，导致菌体和杂酸形成过量，呼吸作用加强，影响糖酸转化率。第38页，共86页，星期日，2025年，2月5日(三)PH控制黑曲霉柠檬酸生产菌生长发育适宜pH3~7。一般认为，菌种生长期pH维持在4.5；产酸期的最适pH为2.0~3.0。pH3.0以上容易产生草酸，5.0容易生成葡萄糖酸，3.0以下是柠檬酸积累的条件。第39页，共86页，星期日，2025年，2月5日(四)接种量和接种方式接种量：接种量大小直接决定于进入培养系统的孢子数量。在一定范围内，孢子接种量与产酸数量成正比，随着孢子接种量的增加，柠檬酸产率也提高。接种方式：孢子直接接种和菌丝体（种子罐）接种。第40页，共86页，星期日，2025年，2月5日发酵罐试验中用同样数量的孢子进行孢子接种和二级培养后的菌丝接种，所得结果证明：孢子接种虽然初期产酸缓慢，但发酵24h后，生酸速率明显提高，而且有后劲，最终产酸率高于菌丝种子。菌丝种子接种时，在同样接种量的条件下，产酸水平随着营养成分加高而提高。另外，菌丝接种时，如果接入发酵罐的种子内存在杂菌，这些杂菌从受到低pH抑制的种子培养基环境，恢复到自然pH环境的发酵液中，正好适宜多数杂菌繁殖。若生产菌株不能迅速产酸以降低pH，染菌几率则增大。事实证明采用孢子接种能收到良好的效果。第41页，共86页，星期日，2025年，2月5日(五)溶解氧