模块五　第十单元　长句表达（五）　生物技术与工程的概念、原理分析与应用.pptxVIP

;;;（2024·河北卷）新城疫病毒可引起家禽急性败血性传染病，我国科学家将该病毒相关基因改造为r2HN，使其在水稻胚乳特异表达，制备获得r2HN疫苗，并对其免疫效果进行了检测。回答下列问题：;注KpnⅠ、HindⅢ、SacⅠ和EcoRⅠ标注的位点为各限制酶的识别位点。;解析：利用水稻细胞培育能表达r2HN基因的水稻胚乳细胞生物反应器，需要使用在水稻胚乳细胞中特异性表达的基因的启动子。Nos为终止子，终止子所起作用为终止转录。r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点，KpnⅠ会破坏启动子序列，因而不能选用；SacⅠ位于终止子序列之外，因而不能选用。故为了将目的基因插入载体的启动子和终止子之间，需要选用HindⅢ和EcoRⅠ对r2HN基因与载体进行酶切。;(2)利用______________方法将r2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测r2HN表达情况，可通过PCR技术检测______________________________，通过__________________技术检测是否翻译出r2HN蛋白。

解析：获得水稻愈伤组织后，通过农杆菌转化的方法使目的基因进入水稻细胞。为检测r2HN表达情况，可通过PCR技术检测转录所产生的相应的mRNA，可从转基因水稻中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交检测是否翻译出r2HN蛋白。;(3)获得转基因植株后，通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。此类植株自交一代后，r2HN纯合体植株的占比为______。选择纯合体进行后续研究的原因是_______________________________。

解析：单一位点插入目的基因的植株相当于杂合子，其自交后代含有r2HN基因的纯合子占1/4。由于纯合体自交后代不发生性状分离，所以选择纯合体进行后续研究。;(4)制备r2HN疫苗后，为研究其免疫效果，对实验组鸡进行接种，对照组注射疫苗溶剂。检测两组鸡体内抗新城疫病毒抗体水平和特异应答的CD8＋T细胞（细胞毒性T细胞）水平，结果如图2所示。据此分析，获得的r2HN疫苗能够成功激活鸡的_______免疫和_______免疫。

解析：据图可知，实验组的抗体水平和CD8＋T细胞水平都比对照组高，说明通过体液免疫产生了抗体，通过细胞免疫产生了特异应答的细胞毒性T细胞，即r2HN疫苗能够成功激活鸡的体液免疫和细胞免疫。;(5)利用水稻作为生物反应器???产r2HN疫苗的优点是___________________

____________________________。（答出两点即可）

解析：通过水稻作为生物反应器生产r2HN疫苗具有不受性别的限制、可大量种植、成本低、安全性高等优点。;;①链接教材P90和题目相应信息“使r2HN仅在水稻胚乳表达”，则应该选用在水稻胚乳细胞中特异性表达的基因的启动子。

②链接教材P80终止子的作用。

③④链接题图，r2HN基因要插入GtP和Nos之间，因此在GtP和Nos之间选择切割位点。

⑤⑥⑦链接教材P80～82基因工程的基本操作程序第三步和第四步相关知识。;⑧链接题目信息“单一位点插入目的基因”，即只有一条染色体上插入该基因，该个体自交子代r2HN纯合子比例为1/4。

⑨链接题目信息“选择纯合体进行后续研究”，可根据纯合体自交后代不出现性状分离解答。

⑩?链接题图信息，根据实验组抗体和CD8＋T细胞的相对值高于对照组，可得r2HN疫苗能够成功激活鸡的体液免疫和细胞免疫。

?链接题目信息“水稻作为生物反应器”，可从植物反应器与动物反应器比较答出其优点。;;;1．（2024·安徽卷）丁二醇广泛应用于化妆品和食品等领域。兴趣小组在已改造的大肠杆菌中引入合成丁二醇的关键基因X，以提高丁二醇的产量。回答下列问题：

(1)扩增X基因时，PCR反应中需要使用TaqDNA聚合酶，原因是______________________________________________________________________________________________________________________________________________。;解析：在PCR反应中，变性的温度需要90℃以上，需要利用高温使DNA双链解旋，普通的DNA聚合酶在高温下会变性失活，而TaqDNA聚合酶能够耐高温，在高温条件下依然具有活性，因此扩增X基因时，PCR反应中需要使用TaqDNA聚合酶。;(2)使用BamHⅠ和SalⅠ限制酶处理质粒和X基因，连接后转化大肠杆菌，并涂布在无抗生素平板上（如图）。在此基础上，进一步筛选含目的基因菌株的实验思路是_________________________________________________

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