第六讲的转录与转录后加工.pptVIP

第1页，共41页，星期日，2025年，2月5日RNA转录概述以DNA为模板合成RNA的过程称为转录。转录以DNA的一条链作为模板合成RNA分子，合成以碱基配对的方式进行，产生的RNA链与DNA模板链互补。转录也是一种酶促的核苷酸聚合过程，所需的酶叫做DNA指导的RNA聚合酶。第2页，共41页，星期日，2025年，2月5日RNA转录的特点以DNA双链的反义链为模板以4种三磷酸核苷(NTPs)为底物遵循碱基互补配对原则RNA链从5’→3’连续合成转录过程需要Mn2+或Mg2+转录过程不需要引物RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性第3页，共41页，星期日，2025年，2月5日RNA转录的基本过程模板识别RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程。转录起始RNA聚合酶的结合导致启动子附近的DNA双链解旋并解链，形成转录泡，促使RNA链第一个核苷酸键产生。转录延伸RNA聚合酶沿模板DNA链移动并使新生RNA不断伸长。转录终止RNA链延伸到转录终止位点时，转录进入终止过程。第4页，共41页，星期日，2025年，2月5日RNA聚合酶大肠杆菌RNA聚合酶亚基基因相对分子量亚基数组分功能αrpoA3.65×1042核心酶核心酶组装，启动子识别βrpoB1.51×1051核心酶β和β’共同形成RNA合成的活性中心β’rpoC1.55×1051核心酶ω?11×1041核心酶未知σrpoD7.0×1041σ因子存在多种σ因子，用于识别不同的启动子第5页，共41页，星期日，2025年，2月5日σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始,它是酶的别构效应物，使酶专一性识别模板上的启动子。在某些细菌细胞内含有能识别不同启动子的σ因子，以适应不同生长发育阶段的要求，调控不同基因转录的起始。大肠杆菌RNA聚合酶第6页，共41页，星期日，2025年，2月5日第7页，共41页，星期日，2025年，2月5日RNA聚合酶的结构 在电镜下观察RNA聚合酶，其外形犹如右手，拇指与食指间的凹槽正好结合DNA。RNA聚合酶很大，它与DNA结合，其覆盖DNA的范围大约是40bp。第8页，共41页，星期日，2025年，2月5日RNA聚合酶真核生物的RNA聚合酶酶的种类分布转录产物对α-鹅膏蕈碱的敏感性相对活性RNA聚合酶Ⅰ核仁45SrRNA不敏感50-70%RNA聚合酶Ⅱ核质hnRNA敏感20-40%RNA聚合酶Ⅲ核质tRNA,5SrRNA,snRNA存在物种特异性约10%线粒体RNA聚合酶线粒体线粒体RNA不敏感叶绿体RNA聚合酶叶绿体叶绿体RNA不敏感第9页，共41页，星期日，2025年，2月5日启动子与转录起始RNA的转录单元启动子是指为RNA聚合酶提供识别、结合位点并起始转录的DNA序列。为转录提供终止信号的DNA序列称为终止子。转录单元是一段从启动子开始至终止子结束的DNA序列。转录起始位点是指与新生RNA链第一个核苷酸相对应的DNA链上的碱基，通常为一个嘌呤。第10页，共41页，星期日，2025年，2月5日启动子的结构大肠杆菌启动子的结构真核生物启动子的结构第11页，共41页，星期日，2025年，2月5日原核生物启动子的共同点结构典型序列保守位置和距离都比较恒定直接和多聚酶相结合常与操纵子相邻都在其控制基因的5’端决定转录的启动和方向第12页，共41页，星期日，2025年，2月5日启动子与转录起始启动子的识别一般认为，RNA聚合酶并不直接识别碱基对本身，而是通过氢键互补的方式加以识别。这也表明，启动子功能既受DNA序列的影响，又受其构象的影响。第13页，共41页，星期日，2025年，2月5日启动子与转录起始启动子的效率启动子有强弱之分，研究表明，强弱启动子的差别在于-35区，以及-10区与-35区之间的距离，其距离大约是16-19bp。第14页，共41页，星期日，2025年，2月5日真核生物启动子真核生物有三种RNA聚合酶，需要三类不同的启动子，它们都由转录因子而不是RNA聚合酶所识别。Ⅰ型启动子Ⅱ型启动子Ⅲ型启动子RNA聚合酶Ⅰ的启动子，它控制rRNA前体基