细胞培养的设施与基本条件 (2).pptVIP

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植物细胞工程实验室的常用仪器设备有:光照培养箱:植物材料少量培养;光照、暗箱;调湿与不可调湿;人工气候箱(全自动调温、调湿、控光)人工气候室:模拟自然界的各种气象条件,精确控制室内的温度、光照、湿度、CO2等,在种子发芽、植物培养、组培、植保等领域应用广泛摇床:细胞悬浮培养,常用振荡速度100r/min培养瓶:玻璃三角瓶、试管、光口玻璃瓶;硼硅酸盐玻璃器皿第31页,共44页,星期日,2025年,2月5日第1页,共44页,星期日,2025年,2月5日预防培养细胞受到污染是细胞培养成功与否的关键为什么?生物体内的细胞可以通过机体的代谢、调节和保护等机制而使其营养、环境、生长条件、抵抗有害因子能力等方面处于最佳状况。而体外培养的细胞由于失去了对整体的依赖性,对实验室细胞培养的设施条件和人员素质提出了较高的要求。为了最大限度的创造既适合于细胞生长又可防治污染的环境,在培养过程中对细胞培养的设施、操作规程和检测方法等制定了严格的规范要求。第2页,共44页,星期日,2025年,2月5日细胞工程实验室与其他一般实验室的主要区别在于,要求保持严格无菌环境,避免微生物及其他有害因子的影响。一般来讲,它应能进行六方面的工作:无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌处理和储藏。第3页,共44页,星期日,2025年,2月5日一般来讲,它应能进行六方面的工作:无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌处理和储藏。各区最好分别设置于相连的各个房间,特别是无菌操作室最好能单独设置。如安排在一大实验室内,则无菌操作区与清洗、消毒灭菌区应分别位于两端,而培养、制备和储藏区位于此两区之间。动物细胞工程实验室的设置1.1细胞工程实验室的设置第4页,共44页,星期日,2025年,2月5日有其特殊的设置,如具有光照条件的培养室,试管苗培育所需的温室和移植驯化室等。植物细胞工程实验室的设置第5页,共44页,星期日,2025年,2月5日基本实验室1.1清洗间根据工作量的大小决定其大小,一般面积控制在30~50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿、用具和培养材料等。中央实验台还应配置2个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机。准备1~2个洗液缸,专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。还应配置落水架、干燥箱、超声波清洗器、纯水制备等。地面应耐湿并排水良好。第6页,共44页,星期日,2025年,2月5日超声波清洗机电热干燥箱纯水仪洗瓶机第7页,共44页,星期日,2025年,2月5日主要用于有关培养用液体、培养基母液和培养基的配制等。

面积60m2左右,配备的主要仪器设备有:冰箱、实验台、药品柜、器械柜、天平、微波炉、pH计、玻璃棒、烧杯、磁力搅拌器、培养基分装器、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管(器)、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。冰箱以体积180~200L为宜,用于储存培养基母液、激素、维生素等贵重药品、彩色胶卷及保存植物材料。天平应有不同感量。1.2制备室第8页,共44页,星期日,2025年,2月5日pH计天平移液器第9页,共44页,星期日,2025年,2月5日用于培养细胞所用器械、培养基的消毒与灭菌。

配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干燥箱、消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅,较大的实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。

如果没有条件的话,可以将上述工作间合并成一个准备间,要求设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风,地面要便于清洁、防滑。1.3消毒间第10页,共44页,星期日,2025年,2月5日第11页,共44页,星期日,2025年,2月5日无菌操作室主要用于实验材料的接种操作,所以又叫接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。

室内应配有超净工作台、紫外灯、酒精灯、解剖镜、各种接种器械等。1.4无菌操作室第12页,共44页,星期日,2025年,2月5日超净工作台离心机第13页,

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