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环境昆虫学报2023,45(5):1318-1332
JournalofEnwironmentalEntomologydoi:10.3969/j.issn.1674-0858.2023.05.18
杜炫星,牛敏敏,赵清,蔡波,卢运运,魏久锋,张虎芳.李白盾转录组分析及SSR位点开发[J].环境昆虫学报,2023,45(5):
1318-1332.
李白盾转录组分析及SSR位点开发
杜炫星,牛敏敏,赵清,蔡,波”,
卢运运,魏久锋,张虎芳1.2*
(1.山西农业大学植物保护学院,山西太谷030801;2.州师范学院生物系,山西忻州034000;
3.海口海关热带植物隔离检疫中心,海口570311)
摘要:李白盾Pseudaulacaspisprunicola(Maskell)寄主范围广泛,是一种重要的人侵害虫。本研究利用高通量测
序平台(IlluminaNovaSeq6000)对李白盾进行转录组测序、denovo从头组装及功能注释,在此基础上筛选其微
卫星(SSR)位点,并挖掘微卫星引物。研究共获得李白盾转录组60296条转录本,24967条单基因
(unigenes)序列。通过GO数据库注释,将所有unigenes的功能分为生物学进程、细胞组分和分子功能三大类
41个亚类功能区。K0G数据库注释结果显示,5085条unigenes归到25个基因家族,注释到一般功能预测的数目
最多。KEGG代谢通路富集分析显示6668条unigenes注释到280个代谢通路,其中注释到内质网中蛋白质加工的
数目最多。利用MISA软件共搜索到微卫星位点18193个,分布在9043条unigenes中,占总unigenes数量的
36.22%,平均每2.29kb出现一个SSR位点。其中主要重复类型为单核苷酸重复,占SSR位点总数的72.03%,
其次为三核苷酸重复(15.90%)和二核苷酸重复(8.48%)。单核苷酸重复主要为A/T(71.16%),二核苷酸重
复主要为AG/CT(5.20%)。基于PrimerPrimer3软件设计出12538对李白盾SSR引物,从中随机挑选50对引
物进行PCR验证,共29对引物可以稳定扩增出目的片段。本研究成功组装了李白盾转录组数据,并基于转录
组数据成功筛选出其微卫星位点,为未来该虫的种群遗传学以及入侵生物学研究提供了数据支撑。
关键词:李白盾;高通量测序;转录组分析;微卫星;分子标记
中图分类号:Q963;S433文献标识码:A
AnalysisofthetranscriptomeanddevelopmentofSSRLociinPseudaulacaspis
prunicola(Maskell)
DUXuan-Xing,NIUMin-Min,ZHAOQing,CAIBo,LUYun-Yun,WEIJiu-Feng,ZHANG
Hu-Fang2*(i.ShanxiAgrieulturalUniversity,CollegeofPlantProtection,TaiguO30801,Shanxi
Province,China;2.XinzhouTeachersUniversity,DepartmentofBiology,Xinzhou034000,Shanxi
Province,China;3.HaikouCustoms,TropicalPlantQuarantineCenter,Haikou570311,China)
Abstract:Pseudaulacaspisprunicola(Maskell)isanimportantinvasivepestwithawidehostrange.The
transcriptomeofP.prunicolawassequencedbasedonhigh-throughputsequencingplatform
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