第六章原核基因表达调控模式.pptVIP

前导肽转录终止结构第61页，共87页，星期日，2025年，2月5日细菌通过弱化作用弥补阻遏作用的不足，因为阻遏作用只能使转录不起始，对于已经起始的转录，只能通过弱化作用使之中途停下来。阻遏作用的信号是细胞内色氨酸的多少；弱化作用的信号则是细胞内载有色氨酸的tRNA的多少。它通过前导肽的翻译来控制转录的进行，在细菌细胞内这两种作用相辅相成，体现着生物体内周密的调控作用。第62页，共87页，星期日，2025年，2月5日三）乳糖操纵子调控模型主要内容：①Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码②这个mRNA分子的启动区（P）位于阻遏基因（I）与操纵区（O）之间，不能单独启动合成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。③操纵基因是DNA上的一小段序列（仅为26bp），是阻遏物的结合位点。④当阻遏物与操纵基因结合时，lacmRNA的转录起始受到抑制。⑤诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵基因结合，从而激发lacmRNA的合成。当有诱导物存在时，操纵基因区没有被阻遏物占据，所以启动子能够顺利起始mRNA的合成。第29页，共87页，星期日，2025年，2月5日第30页，共87页，星期日，2025年，2月5日第31页，共87页，星期日，2025年，2月5日四）影响因子1、lac操纵子的本底水平表达有两个矛盾是操纵子理论所不能解释的：①诱导物需要穿过细胞膜才能与阻遏物结合，而转运诱导物需要透过酶，后者的合成有需要诱导。解释：一些诱导物可以在透过酶不存在时进入细胞？一些透过酶可以在没有诱导物的情况下合成？√第32页，共87页，星期日，2025年，2月5日②真正的诱导物是异构乳糖而非乳糖，前者是在β-半乳糖甘酶的催化下由乳糖形成的，因此，需要有β-半乳糖甘酶的预先存在。解释：本底水平的组成型合成：非诱导状态下有少量的lacmRNA合成。第33页，共87页，星期日，2025年，2月5日2、大肠杆菌对乳糖的反应培养基：甘油按照lac操纵子本底水平的表达，每个细胞内有几个分子的β-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷透过酶；培养基：加入乳糖少量乳糖透过酶进入细胞β-半乳糖苷酶异构乳糖诱导物诱导lacmRNA的生物合成大量乳糖进入细胞多数被降解为葡萄糖和半乳糖（碳源和能源）异构乳糖第34页，共87页，星期日，2025年，2月5日乳糖第35页，共87页，星期日，2025年，2月5日诱导物的加入和去除对lacmRNA的影响第36页，共87页，星期日，2025年，2月5日3、阻遏物lacI基因产物及功能Lac操纵子阻遏物mRNA是由弱启动子控制下组成型合成的，每个细胞中有5-10个阻遏物分子。当I基因由弱启动子突变成强启动子，细胞内就不可能产生足够的诱导物来克服阻遏状态，整个lac操纵子在这些突变体中就不可诱导。第37页，共87页，星期日，2025年，2月5日4、葡萄糖对lac操纵子的影响在乳糖代谢中，β-半乳糖苷酶把乳糖分解成葡萄糖和半乳糖（半乳糖将在gal操纵子的作用下再转化为葡萄糖）。如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中，lac操纵子处于阻遏状态，不能被诱导；一旦耗尽外源葡萄糖，乳糖就会诱导lac操纵子表达分解乳糖所需的三种酶。代谢物阻遏效应第38页，共87页，星期日，2025年，2月5日5、cAMP与代谢物激活蛋白（降解物对基因活性的调节）代谢物激活蛋白（CAP）/环腺甘酸受体蛋白（CRP）第39页，共87页，星期日，2025年，2月5日ZYAOPDNA调控区CAP结合位点启动序列操纵序列结构基因Z：β-半乳糖苷酶Y：透酶A：乙酰基转移酶cAMP—CAP复合物第40页，共87页，星期日，2025年，2月5日第41页，共87页，星期日，2025年，2月5日ATP腺甘酸环化酶cAMP（环腺甘酸）大肠杆菌中：无葡萄糖，cAMP浓度高；有葡萄糖，cAMP浓度低第42页，共87页，星期日，2025年，2月5日++++转录无葡萄糖，cAMP浓度高时促进转录有葡萄糖，cAMP浓度低时不促进转录ZYAOPDNACAPCAPCAPCAPCAPCAPCAP的正调控第43页，共87页，星期日，2025年，2月5日当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。cAMP—CAP复合物与启动子区的结合是转录起始所