细胞工程基本技术.pptVIP

超净工作台第63页，共116页，星期日，2025年，2月5日培养架第64页，共116页，星期日，2025年，2月5日光照培养箱第65页，共116页，星期日，2025年，2月5日摇床第66页，共116页，星期日，2025年，2月5日生物反应器1第67页，共116页，星期日，2025年，2月5日生物反应器2第68页，共116页，星期日，2025年，2月5日植物细胞培养反应器第69页，共116页，星期日，2025年，2月5日显微镜第70页，共116页，星期日，2025年，2月5日无菌技术无菌技术是一个技术体系，涉及多方面因素、多个环节，只有诸因素和环节都处理好，才能达到无菌。培养基器皿材料接种工具操作环境培养室工作台面具体的灭菌方法有多种污染检测与控制第71页，共116页，星期日，2025年，2月5日玻璃器皿清洗浸泡——刷洗——浸酸——冲洗第72页，共116页，星期日，2025年，2月5日常用器械第73页，共116页，星期日，2025年，2月5日无菌室无菌操作室和无菌培养室要求：墙壁光滑、地面平坦无缝，门窗密闭，无空气对流第74页，共116页，星期日，2025年，2月5日培养室1第75页，共116页，星期日，2025年，2月5日培养室2第76页，共116页，星期日，2025年，2月5日工作台面第77页，共116页，星期日，2025年，2月5日灭菌种类物理灭菌：高温高压灭菌、干热灭菌、射线辐照灭菌、过滤灭菌化学灭菌：熏蒸灭菌、消毒液灭菌（酒精、升汞、漂白粉、新洁尔灭、次氯酸钠、次氯酸钙、过氧化氢）抗生素消毒：在动物细胞培养中，常采用青霉素、链霉素、卡那霉素、制霉菌素等抗生素抑制细菌、真菌等污染。根据灭菌对象选择不同的灭菌方法第78页，共116页，星期日，2025年，2月5日高温高压灭菌原理：在121℃高温和0.8kg/cm2-1.1kg/cm2的压力下，一般持续15-20分钟后，就可杀死一切微生物的营养体及其孢子。适用于器皿、工具、衣物和培养基灭菌。第79页，共116页，星期日，2025年，2月5日干热灭菌法将物品放入烘箱，利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固而达到灭菌的目的。适用于玻璃器皿。第80页，共116页，星期日，2025年，2月5日烘箱第81页，共116页，星期日，2025年，2月5日射线灭菌紫外光常用于培养室和接种箱或超净台的灭菌。操作前开灯20分钟可达到灭菌效果。第82页，共116页，星期日，2025年，2月5日PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面第31页，共116页，星期日，2025年，2月5日FITC-AnnexinV染色第32页，共116页，星期日，2025年，2月5日FITC-AnnexinV和PI染色第33页，共116页，星期日，2025年，2月5日梯形电泳图谱第34页，共116页，星期日，2025年，2月5日染色体分析样品处理:秋水仙素低渗处理固定化染色观察第35页，共116页，星期日，2025年，2月5日细胞分离细胞初步分离差速离心分离法单个细胞的获得软琼脂培养法和有限稀释法显微操作分离法流式细胞仪分离激光捕获显微切割免疫磁珠分离第36页，共116页，星期日，2025年，2月5日细胞保存与复苏目前广泛应用的细胞保存方法是低温冷冻保存法预保留细胞经消化分散后，加入冷冻保护液，同时将细胞悬液稀释按1ml/安瓿分装细胞悬液，在火焰下将安瓿封口。将封口的安瓿放入慢冻机内，按1℃/min的速度缓慢冷冻，使温度降至-25℃冻结好的安瓿放入CO2低温冰柜或液氮罐中，温度达-150—--190℃如果需要复苏，可将安瓿取出后立即放入37℃水浴中，使其快速融化第37页，共116页，星期日，2025年，2月5日思考题植物组织培养的基本实验室有哪些？实验室布局的基本要求是什么？消毒灭菌种类有哪几类？使用高压锅的基本步骤是什么？用血球计数板进行计数时，细胞数/L=N*25/5*10*10^6*稀释倍数，N指什么？对细胞进行染色体分析中，样品处理时加秋水仙素起什么作用？简述细胞低温冷冻保存的方法第38页，共116页，星期日，2025年，2月5日第三章、细胞工程基本技术第