第三章薄层色谱法基础.pptVIP

几种新型的展开技术(1)程序蒸气展开（Vapor-programmed，VP）(2)圆形色谱（RadialChromatography）(3)热板色谱(HotplatesChromatography)(4)多次展开（MultipleDevelopment）(5)程序多次展开（programmedMultipleDevelopment，PMD）(6)阶式展开（stepwisedevelopment）(7)梯度展开（gradientdevelopment）第30页，共52页，星期日，2025年，2月5日6展开操作1.展开槽的密闭目的是使展开槽被展开剂蒸气饱和并使展开剂组成不变。2.展开槽的饱和为避免“边缘效应”，在薄层板用展开剂蒸气饱和有时是必要的。3.展开距离常规薄层最长展距为20cm;高效薄层展距最长为10cm。4.展开温度第31页，共52页，星期日，2025年，2月5日展距对结果的影响，硅胶HPTLC分离洋甘菊油，

a）3cm、b）5cm、c）7cm、d）9cm。展距对结果的影响第32页，共52页，星期日，2025年，2月5日(六)薄层层析的定性检测展开完毕后，把薄层从层析缸中取出，用铅笔划出或小针刺出展开剂前缘的位置，随即进行显色，以确定各个斑点的位置、Rf值和显色情况，从而判断试样中含有哪些组分。有色物质经展开后呈现明显的色斑，很易判断。对于无色物质，可根据化合物的性质，用物理检出法、化学检出法、酶与生物检出法和放射性检出法进行显色。第33页，共52页，星期日，2025年，2月5日1物理检出法1.紫外光一般来说，对于未知化合物，展开后在用显色剂以前，都应先在紫外灯下进行察看。紫外光常用两种波254nm与365nm。如果化合物能吸收紫外光同时放出荧光，可用此荧光定位。2.碘元素碘的最大特点是与物质的反应往往是可逆的，当化合物定位以后在空气中放置时，碘即升华挥去，可以回到组分的原来状态，有利于薄层的进一步处理。3.水水可作为一种非破坏性显色剂，用于硅胶薄层，当许多憎水性化合物展开后，用水喷薄层板，对光观察，在半透明的薄层板上，显出白色不透明的斑点。第34页，共52页，星期日，2025年，2月5日2.化学检出法化学检出法是在薄层上使用一种或数种化学试剂与被检出物质反应，生成有颜色的化合物而定位。这种试剂叫显色剂。显色剂一般分为两类，即通用显色剂和专属性显色剂。第35页，共52页，星期日，2025年，2月5日1通用显色剂(1)浓硫酸或50%的硫酸溶液：极大多数有机物质，喷此种显色剂后立刻或在加热到110—120℃并经数分钟后出现棕色到黑色斑点。(2)酸碱指示剂溶液：例如0.3%溴甲酚绿甲醇溶液，在绿色背景上显现黄色斑，表示是脂肪族羧酸。常用的通用显色剂还有：5%磷钼酸乙醇、碱性高锰酸钾溶液、硝酸银-氢氧化铵试剂、荧光显色剂等。2专属性显色剂指能使某一类或少数几类官能团或化合物显色的试剂。例如2%2，4-二硝基苯肼乙醇溶液喷后在120℃加热10分钟，醛酮在黄橙色背景上显红色或橙色斑。第36页，共52页，星期日，2025年，2月5日3原位化学衍生化在色谱分析的综合技术中，尤其对痕量组分的检测，衍生化反应已成为重要手段之一。在薄层色谱中，有些化合物本身无色，又无紫外吸收与荧光，同时也找不到合适的显色剂，或者有性质近似的化合物共存很难分离，这时可考虑在原位进行适当的化学反应，使之产生紫外吸收、荧光、显色，或使性质发生较大差异以利于分离。第37页，共52页，星期日，2025年，2月5日第1页，共52页，星期日，2025年，2月5日目录一前言二基本参数三薄层层析的操作四特殊的薄层五应用举例第2页，共52页，星期日，2025年，2月5日薄层色谱法通常指以吸附剂为固定相的一种液相色谱法。即将固定相在玻璃、金属或塑料等光洁的表面上均匀地铺成薄层，试样点在薄层的一端，流动相借毛细作用流经固定相,使被分离的物质展开。一.前言定义:常用的薄层色谱法以吸附剂为固定相,属于吸附色谱的范