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核酸检测方法试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.目前最常用的核酸检测技术是（）

A.基因测序B.荧光定量PCRC.核酸分子杂交D.生物芯片

答案：B

解析：荧光定量PCR操作相对简便、灵敏度高、特异性强，是目前核酸检测最常用技术。基因测序较复杂成本高；核酸分子杂交操作繁琐；生物芯片应用相对没那么广泛。

2.核酸提取过程中，用于去除蛋白质的试剂是（）

A.乙醇B.氯仿C.异丙醇D.酚

答案：D

解析：酚可以使蛋白质变性沉淀，从而与核酸分离，用于核酸提取时去除蛋白质。乙醇、异丙醇常用于核酸沉淀；氯仿常用于抽提去除脂类等杂质。

3.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性B.复性C.延伸D.转录

答案：D

解析：PCR基本步骤是变性（使双链DNA解开）、复性（引物与模板结合）、延伸（合成新的DNA链）。转录是DNA指导合成RNA的过程，不属于PCR反应步骤。

4.核酸检测样本采集后，一般保存在（）

A.常温B.4℃C.-20℃D.-80℃

答案：C

解析：核酸检测样本采集后，为防止核酸降解，一般保存在-20℃，-80℃可长期保存，但-20℃更常用，常温易使核酸降解，4℃保存时间有限。

5.荧光定量PCR中，用于检测荧光信号的仪器是（）

A.离心机B.酶标仪C.荧光定量PCR仪D.电泳仪

答案：C

解析：荧光定量PCR仪专门用于实时监测荧光信号强度，从而对核酸进行定量分析。离心机用于分离不同密度物质；酶标仪主要用于检测酶促反应；电泳仪用于核酸等物质的电泳分离。

6.核酸分子杂交的原理是（）

A.碱基互补配对B.抗原抗体结合C.蛋白质相互作用D.离子交换

答案：A

解析：核酸分子杂交是利用核酸分子碱基互补配对的特性，使不同来源核酸单链形成双链结构进行检测分析。抗原抗体结合是免疫检测原理；蛋白质相互作用与核酸杂交无关；离子交换是一种分离技术原理。

7.提取核酸时，需要使用的工具酶是（）

A.蛋白酶KB.淀粉酶C.脂肪酶D.纤维素酶

答案：A

解析：蛋白酶K可以分解蛋白质，在核酸提取过程中用于消化样本中的蛋白质，使核酸释放出来。淀粉酶分解淀粉，脂肪酶分解脂肪，纤维素酶分解纤维素，都与核酸提取中蛋白质去除无关。

8.进行核酸检测时，样本类型不包括（）

A.血液B.粪便C.毛发D.痰液

答案：C

解析：血液、粪便、痰液等都可能含有目标核酸，可作为核酸检测样本。毛发主要成分是角蛋白，一般不用于核酸检测样本。

9.基因测序技术能检测（）

A.核酸序列B.核酸浓度C.核酸纯度D.核酸构象

答案：A

解析：基因测序技术的主要功能是测定核酸中碱基的排列顺序，即核酸序列。核酸浓度可用分光光度计等测定；核酸纯度可通过A260/A280等比值判断；核酸构象一般用X射线晶体学等技术分析。

10.核酸检测实验室中，常用的消毒方法是（）

A.紫外线消毒B.干热灭菌C.高压蒸汽灭菌D.化学消毒剂擦拭

答案：A

解析：核酸检测实验室常用紫外线消毒，可破坏微生物DNA等结构。干热灭菌、高压蒸汽灭菌主要用于耐高温物品灭菌；化学消毒剂擦拭主要用于仪器设备表面等消毒，但紫外线消毒方便且对空气和物体表面都有效。

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.核酸检测前样本预处理的方法有（）

A.研磨B.离心C.过滤D.超声破碎

答案：ABCD

解析：研磨可破碎组织细胞释放核酸；离心用于分离不同成分；过滤去除杂质；超声破碎能破坏细胞结构，这些都是核酸检测前样本预处理常用方法。

2.荧光定量PCR的优点有（）

A.灵敏度高B.特异性强C.可定量分析D.操作简单

答案：ABCD

解析：荧光定量PCR灵敏度高可检测到微量核酸；特异性强通过引物设计保证；能准确对核酸进行定量；操作相对其他一些复杂技术较为简单。

3.核酸提取过程中可能用到的试剂有（）

A.裂解液B.蛋白酶KC.无水乙醇D.Tris-HCl缓冲液

答案：ABCD

解析：裂解液用于破碎细胞释放核酸；蛋白酶K消化蛋白质；无水乙醇用于沉淀核酸；Tris-HCl缓冲液维持提取过程中的酸碱度稳定。

4.核酸分子杂交技术包括（）

A.Southern杂交B.Northern杂交C.Western杂交D.原位杂交

答案：ABD

解析：