第四章微生物生长与生活环境.pptVIP

第1页，共25页，星期日，2025年，2月5日第一节微生物纯培养实验室条件下，由一个微生物细胞繁殖得到的后代。纯培养基本步骤：稀释平皿法划线法单细胞挑取法纯培养方法(2)培养(1)分离一、微生物纯培养的概念第2页，共25页，星期日，2025年，2月5日第一节微生物纯培养二、微生物纯培养技术1、稀释平板分离法：倾注平板法和涂布平板法。基本过程：（1）梯度稀释过程；（2）分离培养过程涂布倾注梯度稀释过程10-110-210-310-410-510-6第3页，共25页，星期日，2025年，2月5日第4页，共25页，星期日，2025年，2月5日2、单细胞挑取法：从待分离材料中挑取一个细胞来培养，从而获得纯培养的过程。第一节微生物纯培养二、微生物纯培养技术第5页，共25页，星期日，2025年，2月5日3、平皿划线法用接种环沾少许待分离的材料，在培养基表面进行多次平行划线，使微生物细胞分开生长以获得微生物纯培养的过程。第一节微生物纯培养二、微生物纯培养技术第6页，共25页，星期日，2025年，2月5日三、微生物无菌操作与接种技术培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具（如接种针和吸管等）在无菌条件下接种含菌材料（如样品、菌苔或菌悬液等）于培养基上，这个过程叫做无菌接种操作。在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。（1）培养基与接菌工具的灭菌（2）保证接菌过程的无菌操作第7页，共25页，星期日，2025年，2月5日灭菌方法一、高温灭菌湿热灭菌干热灭菌：干燥条件，160℃维持1-2h。高压蒸汽灭菌法：密闭条件下，水加热蒸发形成高压的同时产生高温。利用高温杀死菌。巴斯德消毒法：采用60-70℃的温度处理15-30min的消毒方法。间歇灭菌法：100℃，30-60min冷却，37℃培养1d反复三次第8页，共25页，星期日，2025年，2月5日1、紫外线：杀菌波长范围：240—300nm杀菌力最强范围：255—265nm二、辐射紫外线杀菌特点：穿透力差，用作表面消毒或空气灭菌，30min灭菌95%以上2、放射性同位素：Co60等，主要用于诱变产生新品种第9页，共25页，星期日，2025年，2月5日（一）纯培养的保存第一节微生物纯培养四、纯培养的保存与复壮保存过程的注意点：防止杂菌污染。1、传代保存法2、液体石蜡覆盖保存法3、载体保存法4、悬液保存法5、寄主保存法6、冷冻保存法第10页，共25页，星期日，2025年，2月5日（二）纯培养的衰退与复壮第一节微生物纯培养四、纯培养的保存与复壮衰退的原因：衰老、变异衰退的表现：生长缓慢优良性状的丧失抗逆性下降衰退的预防：控制传代频率创造良好的培养条件采取有效的保存方式复壮选优汰劣第11页，共25页，星期日，2025年，2月5日一、微生物生长量的测定第二节微生物纯培养群体生长规律微生物生长量的测定微生物数量的测定显微镜直接计数法平板计数法比浊法称重法含N量测定法DNA含量测定法ATP含量测定法代谢活性法微生物重量的测定第12页，共25页，星期日，2025年，2月5日(一)微生物数量的测定1、显微镜直接计数法使用细菌计数板或血球计数板在显微镜下直接计数。优点：操作简便，计数直观。一、微生物生长量的测定第二节微生物纯培养群体生长规律第13页，共25页，星期日，2025年，2月5日2、平板计数法对样品稀释培养，据形成的菌落数计数。优点：传统计数方法。对设备要求不高。一、微生物生长量的测定第二节微生物纯培养群体生长规律10-310-510-410-6第14页，共25页，星期日，2025年，2月5日３、比浊计数法根据细菌悬浮液的吸光度测定其数量。优点：简便，直接。一、微生物生长量的测定第二节微生物纯培养群体生长规律第15页，共25页，星期日，2025年，2月5日(二)微生物重量的测定