第四章第一节染菌的防止.pptVIP

管理不善而染菌，经分析有下表所列原因：染菌原因染菌百分率%进罐前未做设备严密度检查25.8接种违反操作规程25.8检修质量缺乏验收制度19.35操作不熟练19.35配料违反工艺规程6.45调度不当3.25第31页，共64页，星期日，2025年，2月5日（1）从污染杂菌的种类进行分析耐热芽孢杆菌：灭菌不彻底；球菌或无芽孢杆菌：种子染菌、设备渗漏、无菌空气带菌、操作失误；浅绿色杂菌：冷水管渗漏；霉菌：灭菌不彻底或操作问题；酵母菌：糖液灭菌不彻底或放置时间较长第32页，共64页，星期日，2025年，2月5日发酵前期染菌种子带菌、培养基灭菌和设备灭菌不彻底、设备或管道有死角。发酵中后期染菌补料的料液灭菌不彻底或补料管道、阀门渗漏，操作不合理，一般不会是种子问题。（2）从污染杂菌的时间进行分析第33页，共64页，星期日，2025年，2月5日（3）从染菌的程度进行分析数个发酵罐感染相同杂菌：空气系统；个别罐连续感染杂菌：设备问题；第34页，共64页，星期日，2025年，2月5日单罐染菌不是系统问题，而是该罐本身的问题。如种子带菌、培养基灭菌不彻底、罐有渗漏、分过滤器失效。个别发酵罐连续染菌：设备问题(如阀门的渗漏或罐体腐蚀磨损)，设备的腐蚀磨损所引起的染菌会出现每批发酵的染菌时间向前推移的现象。个别发酵罐偶然染菌：原因比较复杂，因为各种染菌途径都可能引起。第35页，共64页，星期日，2025年，2月5日多罐染菌系统问题，如空气过滤系统有问题，特别是总过滤器长期没有检查，可能受潮失效；移种或补料的分配站有渗漏或灭菌不彻底等。第36页，共64页，星期日，2025年，2月5日如果发酵罐偶而染菌，原因一时找不出时一般可以采取以下措施：(1)连续灭菌系统前的料液贮罐在每年4一10月份(杂菌较旺盛生长的时间)加入0.2%甲醛，加热至80°C，存放处理4小时。(2)对染菌的罐，在培养液灭菌前先加甲醛进行空消处理。甲醛用量每立方米罐的体积0.12－0.17升。(3)对染菌的种子罐可在罐内放水进行灭菌，灭菌后水量占罐体的三分之二以上。这是因为细菌芽孢较耐干热而不耐湿热的缘故。第37页，共64页，星期日，2025年，2月5日3、杂菌污染的途径及其预防（1）种子带菌及其防治种子带菌的原因：灭菌不彻底(如假压)；移种污染；培养或保藏过程中污染；无菌室管理不善；第38页，共64页，星期日，2025年，2月5日防止种子带菌措施：制备种子时对沙土管及摇瓶严格加以控制。沙土制备时要多次间歇灭菌注意接种时的无菌操作子瓶、母瓶的移种和培养无菌室和摇床间都要保持清洁。无菌室内要供给恒温恒湿的无菌空气，还要装紫外灯用以灭菌，或用化学药品灭菌。第39页，共64页，星期日，2025年，2月5日无菌室结构要求无菌室面积不宜过大，一般约4—6米2，高约2．6米。为了减少外界空气的侵入，无菌室要有1—3个套间(缓冲过道)无菌室内部的墙壁、天花板要涂白漆或采用磨光石子，要求无裂缝，墙角最好做成圆弧形。室内布置应尽量简单，最好能安装空气调节装置，通入无菌空气并调节室内的温湿度。无菌室的每个套间一般都用紫外线灭菌。第40页，共64页，星期日，2025年，2月5日第41页，共64页，星期日，2025年，2月5日无菌室接种要求打开紫外灯，照半小时，关灯后15分钟再接种。消毒药水擦桌子、拖地，开启超净台的通风，接种时必须在超净台上操作，保证无菌条件。接种人员必须穿好无菌服，戴好口罩，手用酒精棉球擦干净。第42页，共64页，星期日，2025年，2月5日第43页，共64页，星期日，2025年，2月5日（2）过滤空气带菌及其防治无菌空气引起染菌的原因：流程或设备设计的合理性；过虑介质选用、装填；过虑介质的灭菌和管理；空气除菌系统复杂，环节多，偶遇不慎便会导致空气除菌失败。第44页，共64页，星期日，2025年，2月5日空气冷却器的列管穿孔泄露，冷却水会渗入到空气中，造成染菌。棉花-活性炭过滤器长期使用后变薄的一边失效。过滤介质受潮失效：过滤器灭菌完毕应立即缓