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二甲双胍联合伊马替尼：攻克耐伊马替尼K562细胞的增殖与凋亡难题

一、引言

1.1研究背景与意义

慢性粒细胞白血病（ChronicMyeloidLeukemia，CML）是一种起源于造血干细胞的恶性骨髓增殖性疾病，其特征是骨髓中髓系细胞过度增殖。CML的发病与费城染色体（Philadelphiachromosome，Ph）密切相关，95%以上的CML患者存在Ph染色体，这是由9号和22号染色体长臂易位形成，导致BCR-ABL融合基因的产生。BCR-ABL融合蛋白具有持续激活的酪氨酸激酶活性，能够激活一系列下游信号通路，如RAS/RAF/MEK/ERK、PI3K/Akt和JAK/STAT等，从而促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、增强细胞迁移和黏附能力，最终导致白血病的发生和发展。

伊马替尼（Imatinib）作为第一代酪氨酸激酶抑制剂（TyrosineKinaseInhibitor，TKI），是治疗CML的一线药物。它能够竞争性结合BCR-ABL融合蛋白的ATP结合位点，阻止ATP的结合，进而抑制激酶的活性，阻断下游信号传导通路，达到抑制CML细胞增殖的目的。自伊马替尼问世以来，CML患者的治疗效果得到了显著改善，长期生存率大幅提高。在治疗2年内融合基因转阴的患者，其寿命可接近正常人群水平；接受伊马替尼治疗超过10年的患者中，约83%仍然健康，且大部分融合基因已转阴。

然而，伊马替尼耐药问题逐渐成为限制其疗效的关键因素。临床研究表明，约20-30%的CML患者在使用伊马替尼治疗过程中会产生耐药性。伊马替尼耐药可分为原发耐药和继发耐药。原发耐药指治疗无效，包括治疗开始后疾病进展或疾病稳定小于6个月的，这部分患者占CML总人群的一定比例。继发耐药指伊马替尼初始治疗有效，治疗后疾病稳定6个月后再次发生疾病进展，通常发生在伊马替尼治疗后18-24个月后出现。

伊马替尼耐药的机制较为复杂，主要包括BCR-ABL激酶突变、激酶域点突变、激酶域以外的耐药突变、旁路信号通路激活等。其中，BCR-ABL激酶突变是伊马替尼耐药的主要原因之一，如T315I、V299L、E255K等突变，这些突变导致激酶活性增强，使伊马替尼失去抑制作用。此外，信号旁路的激活也是伊马替尼继发耐药机制之一，例如PI3K/Akt、RAS/RAF/MEK/ERK等信号通路在伊马替尼耐药细胞中活性增强，促进细胞增殖。

伊马替尼耐药后，患者的疾病进展风险增加，治疗选择相对有限，预后变差。目前，对于伊马替尼耐药的患者，虽然有二代、三代TKI以及造血干细胞移植等治疗方法，但这些方法存在着毒副作用大、费用高昂、供体来源有限等问题。因此，寻找新的治疗策略来克服伊马替尼耐药具有重要的临床意义。

二甲双胍（Metformin）是一种广泛应用于临床的口服降糖药物，主要用于治疗2型糖尿病。近年来，越来越多的研究发现二甲双胍具有多种药理活性，如抗肿瘤、减肥、延缓衰老、改善器官纤维化等。二甲双胍的抗肿瘤作用机制涉及多个方面，包括改善高血糖和高胰岛素血症状态、抑制细胞线粒体的电子转移和氧化磷酸化、激活AMP激活蛋白激酶（AMP-activatedproteinkinase，AMPK）从而抑制哺乳动物的雷帕霉素靶蛋白（mammaliantargetofrapamycin，mTOR）、通过抑制CyclinD1表达而纠正细胞周期紊乱等。研究发现，二甲双胍呈时间-剂量依赖性地抑制SW-480细胞生长，其可能的抗肿瘤作用机制包括改善高血糖和高胰岛素血症状态，抑制细胞线粒体的电子转移，抑制氧化磷酸化，并可通过影响肝细胞内呼吸链复合物1导致细胞凋亡，激活AMPK，抑制mTOR；通过抑制CyclinD1表达而纠正AGEs诱导的细胞周期紊乱，并有效抑制AGEs诱导的端粒酶活性，从而发挥抑制AGEs诱导的SW-480细胞增殖作用，减弱SW-480细胞的恶性程度。

基于二甲双胍的抗肿瘤特性以及CML患者伊马替尼耐药的现状，本研究旨在探究二甲双胍联合伊马替尼对耐伊马替尼的K562细胞增殖及凋亡的影响。K562细胞是一种人白血病细胞株，广泛应用于白血病研究，耐伊马替尼的K562细胞系可模拟临床中伊马替尼耐药的情况。通过本研究，期望能够为解决CML治疗中伊马替尼耐药问题提供新的思路和潜在的治疗方案，同时也为进一步深入研究二甲双胍的抗肿瘤机制以及联合用药策略奠定基础，对提高CML患者的治疗效果和改善预后具有重要的理论和实践意义。

1.2国内外研究现状

1.2.1伊