胞外高产植物乳杆菌的分离鉴定及体外益生特性评价.docxVIP

胞外高产植物乳杆菌的分离鉴定及体外益生特性评价

目录

一、内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.3研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.4技术路线与创新点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.1.1样品采集与预处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.1.2主要试剂与仪器设备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.2分离纯化方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.2.1选择性培养基筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.2.2纯化与保藏技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.3鉴定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.3.1形态学与生理生化特性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

2.3.2分子生物学鉴定（16SrRNA基因测序）．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.4益生特性评价体系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.4.1耐受性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.4.2黏附能力评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.4.3抑菌活性筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.4.4安全性检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

三、结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

3.1乳酸菌分离结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

3.1.1菌落形态与筛选效率．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

3.1.2优势菌株初筛．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

3.2鉴定结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

3.2.1表型特征鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

3.2.2基因型鉴定与系统发育分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

3.3益生特性评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59

3.3.1耐受力表现．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60

3.3.2黏附能力量化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61

3.3.3抑菌谱与活性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．63

3.3.4安全性指标验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．69

四、讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．73

4.1分离策略的优化与局限性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．75

4.2鉴定方法的选择依据．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．79

4.3益生特性的应用潜力．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．80

4.4与同类研究的对比．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．