实验一血涂片的制作及免疫细胞的形态观察.pptVIP

实验一血涂片的制作及免疫细胞的形态观察第1页，共12页，星期日，2025年，2月5日一、实验目的①掌握微量采血及血涂片的制作方法②学习使用光学显微镜观察免疫细胞第2页，共12页，星期日，2025年，2月5日二、实验原理血涂片是临床化验中最常规的技术，也是血液学研究中的最基本技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，经瑞氏（Wright）染液染色后，不同免疫细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色。根据细胞中颗粒的颜色、大小及多少，再结合细胞的大小及细胞核的形态，就可以将免疫细胞进行分类计数。第3页，共12页，星期日，2025年，2月5日三、实验器材器材：医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片等试剂：瑞氏（Wright）染液，瑞特氏染料0.1克溶于60ml甲醇中，过滤。贮褐色瓶中备用。（配置时，要先将瑞特氏染料置研钵体内边研边滴加甲醇，使染料溶液得更好。）第4页，共12页，星期日，2025年，2月5日四、实验步骤1．采血采血前用70%酒精棉球消毒人的指腹或耳垂，干后用采血针刺破指腹或耳垂的皮肤；动物采血时先将耳部剪毛，酒精消毒后，刺破动物耳部皮肤，挤去第一滴血不要（因含单核细胞较多）。第5页，共12页，星期日，2025年，2月5日第6页，共12页，星期日，2025年，2月5日2．涂片挤出第二滴血置于载玻片的一端，再取另一张边缘光滑的载玻片，斜置于血涂片的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状，两玻片的角度以30~40O为宜（角度过大血膜较厚，角度小则血膜薄），轻轻将载玻片向前推进，即涂成血液薄膜（如图），推进时速度要一致，否则血膜成波浪形，厚薄不匀。第7页，共12页，星期日，2025年，2月5日第8页，共12页，星期日，2025年，2月5日3．染色待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴瑞氏染液盖满血膜为止，染色1~3min。然后滴加等量的缓冲液（pH6.4）或蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干，镜检。第9页，共12页，星期日，2025年，2月5日