核酸类药物的生产.pptxVIP

生化药物概述氨基酸类药物的生产多肽和蛋白质类药物的生产核酸类药物的生产酶类药物的生产糖类药物的生产脂类药物的生产维生素和辅酶类药物的生产第二章天然生物材料的提取制药

核酸类药物的生产核酸知识复习核酸药物的分类核酸类药物的生产方法核酸类药物的生产实例核酸类药物的检测思考题

核酸知识复习核糖（核糖脱氧核糖）核苷嘌呤（腺嘌呤、鸟嘌呤）碱基核酸核苷酸嘧啶（胞、尿、胸腺嘧啶）（DNA、RNA）磷酸DNA和RNA是存在于细胞中的正常成分。DNA主要存在于细胞核中，少量（2%）存在于线粒体和叶绿体中；RNA主要存在于细胞质中，少量（10%）存在于核仁、核浆和染色体中。核酸的含量与细胞大小无关，以生长旺盛的组织细胞中含量较多，如动物胰脏、脾脏、胸腺，植物的茎尖、根尖及各种分生组织等。

核酸药物的分类具有天然结构的核酸类物质如：DNA、RNA、肌苷、ATP、辅酶A、脱氧核苷酸、肌苷酸等。获得：微生物发酵或从生物资源中提取生产。药理功能：有助于改善机体的物质代谢和能量代谢平衡，加速受损组织的修复，促使机体恢复正常生理功能。著名企业：珍奥集团、GENTA公司

天然碱基、核苷、核苷酸的类似物或聚合物治疗病毒病如乙肝、肿瘤、爱滋病的重要药物，也是产生干扰素、免疫抑制剂的临床药物。药理功能：获得：如：三氟代胸苷、叠氮胸苷、拉米夫定（嘧啶类）、阿德福韦（嘌呤类）、恩替卡韦（第三代核苷类抗乙肝病毒药物）等。由自然结构的核酸类物质通过半合成生产。核酸药物的分类

除病毒外，所有的动植物组织中都含有核酸类物质，包括大分子DNA和RNA、小分子的核苷酸、核苷、碱基等成分，但不同的组织中含量有所不同。动物胸腺中DNA含量较多，是提取DNA的原料；酵母细胞中RNA含量最多，是提取生产RNA的主要原料。核酸类药物的原材料核酸类药物的生产方法

DNA和RNA的生产方法核酸类药物的生产方法分离提取核酸的生产一般采用提取法，即从粉碎、破裂的生物组织细胞中通过一定的方法获取总DNA或总RNA。如需进一步的纯化，常用纯化方法如柱层析、凝胶电泳和密度梯度超离心。人工合成获取大分子核酸的另一方法是人工合成，即利用化学的方法按照设定的核苷酸顺序逐一加入形成核酸。现已有核酸合成仪，但合成长度还有一定限制，并且该仪器价格昂贵。因此这种方法一般用于研究，不适合生产。产酵母，从酵母中提取RNA，RNA经青霉菌属或链霉菌属等微生物产生的酶进行酶解，制成各种核苷酸。1、酶解法采用营养缺陷型菌株或营养缺陷型兼结构类似物抗性菌株来发酵大量生产目的核苷或核苷酸。3、直接发酵法微生物发酵与化学合成并用。2、半合成法酶解法、半合成法、发酵法（三）核苷酸、核苷及碱基类似物的生产方法核酸类药物的生产方法

核酸类药物的生产实例（一）DNA的生产技术提取原理在细胞内的核酸通常是与蛋白质形成复合物——核糖核蛋白（RNP）和脱氧核糖核蛋白（DNP），这两种复合物在不同电解质溶液中的溶解度有较大差异。RNA＋pro.→RNP（核糖核蛋白）DNA＋pro.→DNP（脱氧核糖核蛋白）0→0.14MNaCl溶液DNP溶解度逐渐降低，RNP的溶解度很大；0.14M→0.5MNaCl溶液DNP溶解度逐渐增加。在制备DNA时，可利用0.14MNaCl溶液使DNP与RNP分开。由于DNP在浓盐溶液中的溶解度比稀溶液大得多，所以，首先采用浓盐溶液（1～2M）尽量抽提DNP，然后再去除杂蛋白。

核酸类药物的生产实例工艺路线[抽提]猪脾脏[预处理]冷冻，绞碎组织浆液[预处理]0.1MNaCl-0.5M柠檬酸混合液，离心沉淀1.71MNaCl上清液（DNP）沉淀（DNP）溶解液0.14MNaCl沉淀物白色纤维状DNA10%NaCl上清液（DNA）氯仿-异戊醇95%乙醇真空干燥

核酸类药物的生产实例RNA的生产来源：微生物——酵母通常在细菌中RNA占5～25％，在啤酒酵母中占2.7～15％，在霉菌中占0.7~28%，面包酵母含RNA4.1～7.2％。酵母菌体提取优点：收率高；提取容易。

核酸类药物的生产实例RNA的提取——等电沉淀法提取液抽提清液RNA粗品pH2.5工艺过程预处理：压榨、除水；（2）提取：0.13%NaOH，使细胞壁变性，使核酸从细胞内释放出来；（3）中和、除菌体；（4）分离：等电点法，调pH2.5，使RNA沉淀下来；（5）洗涤、干燥酵母菌体RNA精品稀NaOH，提取洗涤、干燥中和，分离

核酸类药物的生产实例（三）ATP制备腺嘌呤前体腺苷AMPATP枯草杆菌160（Smr+