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上海pcr上岗证考试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的基本原理是（）

A.基因重组

B.核酸杂交

C.碱基互补配对

D.蛋白质合成

答案：C

2.在PCR反应中，起延伸作用的酶是（）

A.限制性内切酶

B.Taq酶

C.逆转录酶

D.DNA连接酶

答案：B

3.PCR反应中，变性温度一般为（）

A.90-95℃

B.50-60℃

C.70-75℃

D.30-40℃

答案：A

4.以下哪种物质不是PCR反应的基本成分（）

A.模板DNA

B.dNTPs

C.RNA聚合酶

D.引物

答案：C

5.PCR反应中引物的作用是（）

A.提供3-OH末端

B.提供5-OH末端

C.提供能量

D.提供模板

答案：A

6.在荧光定量PCR中，用于检测扩增产物的是（）

A.溴化乙锭

B.荧光染料或荧光标记的探针

C.考马斯亮蓝

D.琼脂糖

答案：B

7.PCR产物的特异性取决于（）

A.引物的特异性

B.Taq酶的活性

C.模板的量

D.dNTPs的浓度

答案：A

8.以下关于PCR的叙述错误的是（）

A.可用于基因克隆

B.可用于疾病诊断

C.只能扩增DNA

D.可用于基因表达分析

答案：C（也可用于RNA的扩增，如逆转录PCR）

9.PCR反应中，退火温度主要取决于（）

A.引物的长度和GC含量

B.模板的长度

C.Taq酶的活性

D.dNTPs的浓度

答案：A

10.为了提高PCR的特异性，可以（）

A.降低退火温度

B.增加引物浓度

C.减少模板量

D.提高退火温度

答案：D

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应体系包含以下哪些成分（）

A.模板DNA

B.引物

C.Taq酶

D.dNTPs

E.缓冲液

答案：ABCDE

2.以下哪些因素会影响PCR反应的结果（）

A.引物设计

B.模板质量

C.反应温度

D.酶的活性

E.反应时间

答案：ABCDE

3.荧光定量PCR的优点包括（）

A.灵敏度高

B.特异性强

C.能定量分析

D.操作简便

E.结果直观

答案：ABCDE

4.在PCR实验中，防止污染的措施有（）

A.分区操作

B.使用一次性耗材

C.严格遵守操作规程

D.定期对仪器设备消毒

E.实验前后环境清洁

答案：ABCDE

5.以下关于引物设计的原则正确的是（）

A.长度一般为18-25bp

B.GC含量在40%-60%

C.避免引物自身形成二级结构

D.引物之间不能互补

E.3端不能有较多的连续G或C

答案：ABCDE

6.PCR技术在以下哪些领域有应用（）

A.医学诊断

B.法医鉴定

C.农业育种

D.生物进化研究

E.环境监测

答案：ABCDE

7.以下哪些是PCR产物的检测方法（）

A.琼脂糖凝胶电泳

B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.荧光定量检测

D.酶切分析

E.测序

答案：ABCDE

8.以下关于Taq酶的特点正确的是（）

A.热稳定性高

B.具有5-3聚合酶活性

C.具有3-5外切酶活性

D.最适反应温度为72℃左右

E.是一种DNA聚合酶

答案：ABDE（Taq酶无3-5外切酶活性）

9.在进行PCR实验时，对于模板DNA的要求有（）

A.纯度要高

B.完整性较好

C.浓度合适

D.无抑制物

E.来源明确

答案：ABCDE

10.以下关于PCR反应循环次数的说法正确的是（）

A.循环次数过多会导致非特异性扩增

B.循环次数过少可能导致产物量不足

C.一般为20-35次

D.根据模板量和反应要求确定

E.循环次数与引物浓度有关

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR只能扩增双链DNA。（）

答案：错误

2.Taq酶在95℃变性温度下会完全失活。（）

答案：错误

3.引物