细胞生物学核糖体.pptVIP

细胞生物学核糖体第1页，共21页，星期日，2025年，2月5日第一节核糖体的类型与结构 核糖体是合成蛋白质的细胞器，其唯一的功能是按照mRNA的指令由氨基酸高效且精确地合成多肽链。?核糖体的基本类型与成分?核糖体的结构(自学，略）?核糖体蛋白质与rRNA的功能分析第2页，共21页，星期日，2025年，2月5日一、核糖体的基本类型与成分?核糖核蛋白体,简称核糖体(ribosome) ?基本类型 ?附着核糖体 ?游离核糖体 ?70S的核糖体 ?80S的核糖体 ?主要成分 ?r蛋白质：40%，核糖体表面 ?rRNA:60%,，核糖体内部第3页，共21页，星期日，2025年，2月5日二、核糖体的结构?结构与功能的分析方法?蛋白质合成过程中很多重要步骤与50S核糖体大亚单位相关第4页，共21页，星期日，2025年，2月5日结构与功能的分析方法?离子交换树脂可分离纯化各种r蛋白；?纯化的r蛋白与纯化的rRNA进行核糖体的重组装，显示核糖体中r蛋白与rRNA的结构关系?双向电泳技术可显示出E.coli核糖体在装配各阶段中,与rRNA结合的蛋白质的类型?双功能交联剂和双向电泳分离可用于研究r蛋白在结构上的相互关系?电镜负染色与免疫标记技术结合，研究r蛋白在核糖体的亚单位上的定位。?对rRNA，特别是对16SrRNA结构的研究?70S核糖体的小亚单位中rRNA与全部的r蛋白关系的空间模型第5页，共21页，星期日，2025年，2月5日?同一生物中不同种类的r蛋白的一级结构均不相同，在免疫学上几乎没有同源性。?不同生物同一种类r蛋白之间具有很高的同源性，并在进化上非常保守。第6页，共21页，星期日，2025年，2月5日?蛋白质结合到rRNA上具有先后层次性。?核糖体的重组装是自我装配过程第7页，共21页，星期日，2025年，2月5日?16SrRNA的一级结构是非常保守的?16SrRNA的二级结构具有更高的保守性：臂环结构(stem-loopstructure)?rRNA臂环结构的三级结构模型第8页，共21页，星期日，2025年，2月5日蛋白质合成过程中很多重

要步骤与50S核糖体大亚单位相关?涉及的多数因子为G蛋白(具有GTPase活性)，核糖体上与之相关位点称为GTPase相关位点。?最近人们成功地制备L11-rRNA复合物的晶体，获得了其空间结构高分辨率的三维图象。?这一结果证实了前人用各种实验技术所获得的种种结论?提出直观、可靠且比人们的预料更为精巧复杂和可能的作用机制，从而为揭开核糖体这一具有30多亿年历史的古老的高度复杂的分子机器的运转奥秘迈出了极重要的一步。第9页，共21页，星期日，2025年，2月5日三、核糖体蛋白质与rRNA的功能分析?核糖体上具有一系列与蛋白质合成有关的结合位点与催化位点?在蛋白质合成中肽酰转移酶的活性研究第10页，共21页，星期日，2025年，2月5日核糖体上具有一系列与蛋白质

合成有关的结合位点与催化位点?与mRNA的结合位点?与新掺入的氨酰-tRNA的结合位点——氨酰基位点，又称A位点?与延伸中的肽酰-tRNA的结合位点——肽酰基位点，又称P位点?肽酰转移后与即将释放的tRNA的结合位点——E位点(exitsite)?与肽酰tRNA从A位点转移到P位点有关的转移酶(即延伸因子EF-G)的结合位点?肽酰转移酶的催化位点?与蛋白质合成有关的其它起始因子、延伸因子和终止因子的结合位点第11页，共21页，星期日，2025年，2月5日在蛋白质合成中肽酰转移酶的活性研究?核糖体蛋白?在核糖体中rRNA是起主要作用的结构成分?r蛋白质的主要功能第12页，共21页，星期日，2025年，2月5日核糖体蛋白?很难确定哪一种蛋白具有催化功能：在E.coli中核糖体蛋白突变甚至缺失对蛋白质合成并没有表现出“全”或“无”的影响。?多数抗蛋白质合成抑制剂的突变株，并非由于r蛋白的基因突变而往往是rRNA基因突变。?在整个进化过程中rRNA的结构比核糖体蛋白的结构具有更高的保守性。第13页，共21页，星期日，2025年，2月5日在核糖体中rR