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摘要
利用3D生物打印技术和细菌的强大生化机制,创造具有受控3D形状、微
观结构和动态代谢反应的“生物材料”,是一个值得探索的研究方向。本研究针对
污水脱氮处理,通过微挤出式3D打印技术,设计以海藻酸钠(SA)-明胶(Gel)
双网络生物墨水为基质的3D打印结构,同时以实验室筛选培育的好氧反硝化细
菌作为负载生物,制备出3D新型反硝化微生物材料,并对不同负载细菌浓度、
不同打印结构及不同碳源下的脱氮效果及打印体的生物回收效能进行评价。
选取海藻酸钠-明胶双网络体系作为生物墨水基质,通过调节明胶浓度,制
备五种不同组分的打印墨水,验证了海藻酸钠浓度达2%、明胶浓度达4%以上时
具备成型性,并针对明胶浓度为4%(4%Gel)、6%(6%Gel)及8%(8%Gel)
的实验组分析得到其最适挤出气压范围分别为30-50kPa、80-100kPa、180-200
kPa,可打印性指数分别达到1.056、1.380、1.563,经过流变特性与化学结构分
析,证明了明胶预交联体系的引入对墨水触变性、粘弹性及打印过程中稳态粘度
的促进作用以及钙离子后交联对结构稳定性的提升。
在最佳打印条件下制备4%Gel、6%Gel、8%Gel三组不同组分的打印体,
通过宏观及微观结构的分析,确定了4%Gel组打印体结构的高精度及高功能性,
材料性能分析表明4%Gel组虽然由于其离子交联的特性,在降解率(24.11%)
方面存在性能下降的情况,但其出色的孔隙率(56.16%)、吸水率(101.33%)、
溶胀性能(256.30%)及力学性能(杨氏模量E=0.1075MPa、断裂能Wt=
3
611.69J/m、极限应变ε=110.55%,极限应力σ=0.11MPa)为其提供了更优秀
cc
的物质交换及对恶劣水力条件的抵御能力。
以最佳墨水组成为基质,向其中加入好氧反硝化功能菌群形成生物打印墨水,
并以最佳打印参数将其打印成型,成功制备3D新型反硝化微生物材料,且完成
制备时打印体中的生物活细胞占比达95%以上,在不提供营养的情况下可以维持
微生物至少10天内的生物活性;打印体在仅负载游离菌组10%/20%菌液浓度的
条件下仍能实现72h内完全脱氮,且COD去除率在一周内可以达到90%以上,
并实现了碳源缓释;设计的网状结构相较于普通块状结构在各项指标中均有提升,
说明可控特异性结构对生物修复具有一定的促进作用;将碳源由乙酸钠更换为葡
萄糖后打印体的结构稳定性得到大幅提升且碳源缓释情况下降了约50%;培养回
收的10%/20%菌液浓度3D微生物打印体中活细胞占到细胞总数的
75.39%/84.67%,体现出生物回收的潜力。
关键词:微生物固定化,3D微生物打印,双网络墨水,好氧反硝化
I
ABSTRACT
Using3Dbioprintingtechnologyandthepowerfulbiochemicalmechanismof
bacteriatocreatebiomaterialswithcontrolled3Dshapes,microstructuresand
dynamicmetabolicreactionsisaresearchdirectionwhichisworthexploring.Inthis
study,a3Dbioprintingstructurewasdesi
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