初中生物细胞结构观察实验指导.docxVIP

初中生物细胞结构观察实验指导

一、实验目的

本实验旨在引导同学们初步掌握显微镜的规范操作方法，观察并识别植物细胞（以洋葱鳞片叶内表皮细胞为例）和动物细胞（以人体口腔上皮细胞为例）的基本结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核和液泡等，理解细胞是生物体结构和功能的基本单位，并初步学会制作临时装片的技能，培养细致观察、规范操作和实事求是的科学态度。

二、实验原理

细胞是构成生物体的基本结构和功能单位。由于细胞体积微小，肉眼无法直接观察其精细结构，需借助光学显微镜进行放大观察。显微镜利用凸透镜的成像原理，将微小物体放大成像，使我们能够看清其形态结构。

在观察过程中，为了使细胞结构更加清晰，尤其是细胞核等结构，通常需要对细胞进行染色处理。例如，使用碘液可以将细胞核内的染色体染成深色，便于观察。对于植物细胞，其细胞壁具有支持和保护作用，在光学显微镜下相对容易辨认；而动物细胞没有细胞壁，细胞膜紧贴细胞质，在光镜下不易与细胞质区分，需仔细观察。

三、实验材料与用具

1.实验材料：洋葱鳞片叶、人体口腔上皮细胞（由实验者自行采集）。

2.实验用具：光学显微镜、载玻片、盖玻片、刀片（或解剖针）、镊子、滴管、吸水纸、纱布、烧杯、稀碘液、生理盐水（0.9%氯化钠溶液）、清水。

四、实验步骤与操作要点

（一）制作洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片

1.准备载玻片和盖玻片：

*用洁净的纱布将载玻片和盖玻片擦拭干净。注意动作要轻柔，避免用力过猛损坏盖玻片（盖玻片很薄，易碎）。擦拭时应单向擦拭，以确保玻片洁净、无划痕。

*将擦拭干净的载玻片平放在实验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴清水。水量要适宜，一滴即可，过多易溢出，过少则可能导致细胞干涸。

2.取材：

*取一片新鲜的洋葱鳞片叶，用刀片在其内侧（即凹面）划一个约0.5cmx0.5cm的小方块（或用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明的薄膜——内表皮）。注意不要撕取带有绿色叶肉的部分，以免细胞重叠或结构不典型。

*用镊子将撕下的洋葱内表皮薄膜展平在载玻片中央的清水中，确保薄膜没有折叠、卷曲或重叠，否则会影响观察效果。

3.盖盖玻片：

*用镊子夹起盖玻片，使盖玻片的一侧先接触载玻片上的水滴边缘，然后缓缓放下，盖在洋葱内表皮上。这一步骤的关键是“缓缓放下”，目的是避免产生气泡。如果操作不当产生了较多气泡，可能需要重新制作装片。

4.染色：

*在盖玻片的一侧滴加1-2滴稀碘液。

*用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引，使碘液浸润到标本的全部。注意不要让碘液溢出载玻片，以免污染显微镜载物台。染色时间不宜过长，以免细胞结构被破坏。

（二）制作人的口腔上皮细胞临时装片

1.准备载玻片和盖玻片：

*同样用洁净纱布擦拭载玻片和盖玻片。

*在载玻片中央滴一滴生理盐水（0.9%氯化钠溶液）。这是因为动物细胞没有细胞壁，生理盐水可以维持细胞的正常形态，防止细胞因吸水膨胀或失水皱缩。

2.取材：

*用清水漱口，以清除口腔内的食物残渣。

*用消毒牙签的钝端（注意：必须是消毒过的牙签，且使用钝端，以免损伤口腔黏膜）在自己口腔内侧壁上轻轻刮几下。刮取时力度要适中，过重可能导致出血，过轻则细胞数量不足。

*将牙签上附有碎屑的一端放在载玻片中央的生理盐水中，轻轻涂抹几下，使细胞分散开来，避免细胞堆积。

3.盖盖玻片：

*操作方法同洋葱表皮细胞装片制作，同样要注意避免产生气泡。

4.染色：

*方法同洋葱表皮细胞染色。在盖玻片一侧滴加稀碘液，另一侧用吸水纸吸引。

（三）显微镜的使用与观察

1.取镜与安放：

*右手握住显微镜的镜臂，左手托住镜座，将显微镜从镜箱内取出。动作要轻缓，避免震动。

*将显微镜平稳地放在实验台距边缘约7厘米处，略偏左。安装好低倍物镜（通常是10x物镜）和目镜（通常是5x或10x目镜）。

2.对光：

*转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升。

*转动转换器，使低倍物镜对准通光孔（物镜前端与载物台之间应保持约2厘米的距离）。

*打开光圈（或调至最大光圈），左眼注视目镜内，右眼睁开（便于同时画图或记录）。

*转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。直到通过目镜看到一个明亮的圆形视野为止。若光线过强，可使用平面镜和小光圈；光线过弱，可使用凹面镜和大光圈。

3.放置装片与调焦观察：

*将制作好的临时装片放在载物台上，用压片夹压住，使观察对象（细胞）位于通光孔的中央。

*转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（此时眼睛一定要从侧面看着物镜，以免物镜镜头压碎玻片标本或损坏镜头）。

*左眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到