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基因工程一轮复习最新版ppt_图文;1.基因工程的基本工具

(1)“分子手术刀”——__________

①来源：主要是从__________中分离纯化出来的。

②功能：能够识别双链DNA分子的某种__________的核苷酸序列，并且使每一条链中__________部位的两个核苷酸之间的__________断开，因此具有__________性。

③结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：__________和__________。;（典例1）下列关于限制酶的说法正确的是（）

A、限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少

B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

C、不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端

D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键;(2)“分子缝合针”——__________

①两种DNA连接酶（大肠杆菌DNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：

a.相同点：都缝合__________键。

b.区别：大肠杆菌DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的__________之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合_____________。

②与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将__________加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接__________的末端，形成磷酸二酯键。;

（典例2)右图为DNA分子结构示意图，对该图的

正确描述是(双选题)（）

A．④的名称是胞嘧啶脱氧核苷酸

B．解旋酶作用的部位是⑨

C．某限制性核酸内切酶可选择⑨处作为切点

D．DNA连接酶可连接⑩处断裂的化学键;(3)“分子运输车”——__________

①运载体具备的条件

a.能在受体细胞中复制并稳定保存。

b.具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

c.具有标记基因，供重组DNA的鉴定。

②最常用的运载体是__________,它的化学本质是________________________

③其他运载体：__________、__________。;1.限制酶切割目的基因后形成的黏性末端是两个。()

2.温度和酸碱度不会影响DNA连接酶的活性。()

;

一、目的基因的获取途径

二、构建基因表达载体

三、将目的基因导入受体细胞

四、目的基因的检测与鉴定

;;（典例3）下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：;基因表达载体的构建简图;1、???因表达载体由________、________

________、_____和复制原点组成。;3.将目的基因导入受体细胞中的方法;

4.目的基因的检测与鉴定

(1)首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用_____________________________。

(2)其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用_____________________________________。

(3)最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行_________。

(4)有时还需进行______________的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。;（典例4）天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：

⑴将淀粉酶基因切割下来所用的工具是____________，

用___________将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，

下一步将该DNA分子___________，以完成工程菌的构建。

⑵若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检

测方法是____________；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成

淀粉酶，可采用___________________检测。

;

练一练：

1．下列有关基因工程技术的正确叙述是（）

A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体

B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列

C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快

D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达;2.图（a）中三个DNA片段上依次表示出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三种限制性内切酶的割位点，图（b）为某种表达载体的示意图（载体上的EcoRI、Sau3AI的切点是唯一的）。;2．根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

(1)质粒运载体用EcoR