色谱分析基础 (2).pptVIP

（1）容量因子与分配系数的关系式中：β为相比，即β=Vm/Vs。填充柱相比：6～35；毛细管柱的相比：50～1500。容量因子越大，保留时间越长。VM为流动相体积，即柱内固定相颗粒间的空隙体积；VS为固定相体积，对不同类型色谱柱，VS的含义不同:气-液色谱柱：VS为固定液体积；气-固色谱柱：VS为吸附剂表面容量。*第30页，共56页，星期日，2025年，2月5日（2）分配比与保留时间的关系某组分的k值可由实验测得，等于该组分的调整保留时间与死时间的比值：（3）分配系数K及分配比k与选择因子r2,1的关系如果两组分的K或k值相等，则r2,1=1，两组分的色谱峰必将重合，说明分不开。两组分的K或k值相差越大，则分离得越好。因此两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。*第31页，共56页，星期日，2025年，2月5日基本保留方程可表示为：tR=t0(1+k)若载气流量F0恒定，也可用保留体积表示，则VR=Vm+KVs上式说明，色谱柱确定后，Vm和Vs即为定值。由此可见，分配系数不同的各组分具有不同的保留值，因而在色谱图上有不同位置的色谱峰。（4）基本保留方程*第32页，共56页，星期日，2025年，2月5日例：用一根固定相的体积为0.148mL，流动相的体积为1.26mL的色谱柱分离A,B两个组分，它们的保留时间分别为14.4min，15.4min，不被保留组分的保留时间为4.2min，试计算：

（1）各组分的容量因子

（2）各组分的分配系数

（3）AB两组分的选择因子rB,A解：（1）kA=(14.4min-4.2min)/4.2min=2.43kB=(15.4min-4.2min)/4.2min=2.67K=kβ=kVm/VsKA=kAVm/Vs=2.43×1.26mL/0.148mL=20.7KB=kBVm/Vs=2.67×1.26mL/0.148mL=22.7(3)rB,A=KB/KA=22.7/20.7=1.10*第33页，共56页，星期日，2025年，2月5日色谱理论：色谱理论需要解决的问题：色谱分离过程的热力学和动力学问题。影响分离及柱效的因素与提高柱效的途径，柱效与分离度的评价指标及其关系。组分保留时间为何不同？色谱峰为何变宽？组分保留时间：色谱过程的热力学因素控制；（组分和固定相的结构和性质,如分配系数）色谱峰变宽：色谱过程的动力学因素控制；（两相中的运动阻力，扩散）两种色谱理论：塔板理论和速率理论*第34页，共56页，星期日，2025年，2月5日塔板理论的假设：在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到；这一小段间隔的柱长称为理论塔板高度。(2)将载气看作成脉动（间歇）过程；(3)试样沿色谱柱方向的扩散可忽略；(4)每次分配的分配系数相同。（二）塔板理论-柱分离效能指标1.塔板理论（platetheory）半经验理论，最早由Martin等人提出塔板理论，把色谱柱比作一个精馏塔。将色谱分离过程比拟作蒸馏过程，将连续的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复（类似于蒸馏塔塔板上的平衡过程）；在每一个塔板上，被分离组分达到一次分配平衡。*第35页，共56页，星期日，2025年，2月5日色谱柱长：L，虚拟的塔板间距离（理论塔板高度）：H，色谱柱的理论塔板数：n，则三者的关系为：n=L/H理论塔板数与色谱参数之间的关系为：保留时间包含死时间，在死时间内不参与分配!单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高。用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。*第36页，共56页，星期日，2025年，2月5日2.有效塔板数和有效塔板高度组分在t0时间内不参与柱内分配。需引入有效塔板数和有效塔板高度：*第37页，共56页，星期日，2025年，2月5日例：用一根柱长为1m的色谱柱分离含有A，B，C，D四个组分的混合物，它们的保留时间tR分别为6.4min,14.4min,15.4min,20.7min,其峰底宽Wb分别为0.45min,1.07min,1.16min,1.