基于siRNA技术探究mTOR表达调控对人晶状体上皮细胞生物学行为的影响.docxVIP

基于siRNA技术探究mTOR表达调控对人晶状体上皮细胞生物学行为的影响

一、引言

1.1研究背景与意义

晶状体作为眼内重要的透明双凸透镜状组织，在光线聚焦于视网膜的过程中发挥着不可或缺的关键作用，其功能的正常与否直接关系到视觉质量。而晶状体上皮细胞则是晶状体的核心组成部分，在晶状体的整个生命周期中扮演着极为重要的角色。在胚胎发育阶段，晶状体上皮细胞起源于表皮外胚层的单层细胞，这些细胞在不同调控信号的影响下，分化形成晶状体的不同部位。其中，后部和赤道部的晶状体上皮细胞经历一系列复杂过程，如细胞周期退出、晶体蛋白表达、胞体拉长、脱细胞器及去核等，最终形成初级和次级晶状体纤维；前部晶状体上皮细胞则通过分化扩增形成上皮层，并且部分细胞保留了分化为纤维细胞的能力。任何基因或环境因素对这些环节的干扰，都可能引发晶状体发育异常，进而影响视力。

当晶状体成熟后，前囊下和赤道部的晶状体上皮细胞通过持续的物质合成与交换，以及缓慢的增殖分化活动，维持着晶状体的稳态平衡。这些细胞之间存在着精细的电位差，它们共同构成了晶状体微循环，负责运输能量、氧气等关键物质，以确保晶状体的正常代谢和功能。一旦晶状体微循环出现异常，就可能导致晶状体代谢紊乱，引发白内障等眼部疾病。

白内障是全球范围内首位致盲性眼病，其主要特征是晶状体发生混浊，阻碍光线正常透过，从而严重影响视力。据世界卫生组织（WHO）统计，全球约有1.7亿人因白内障而失明，且随着人口老龄化的加剧，这一数字还在逐年上升。白内障的发生是多种因素共同作用的结果，其中晶状体上皮细胞的异常被认为是关键因素之一。无论是年龄老化导致的晶状体上皮细胞代谢功能衰退，还是紫外线照射对晶状体上皮细胞造成的直接损伤，亦或是全身性疾病（如糖尿病）引发的晶状体上皮细胞内环境改变，都可能干扰晶状体上皮细胞的正常生理功能，导致其增殖、分化和凋亡失衡，最终促使晶状体混浊的发生和发展。

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是一种进化上高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，属于磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶（PIKK）家族成员。mTOR在细胞的生长、增殖、代谢、自噬以及存活等诸多关键生命活动中发挥着核心调控作用。它能够整合细胞内外部的多种信号，如营养物质（氨基酸、葡萄糖等）、生长因子（胰岛素、表皮生长因子等）、能量水平（ATP浓度）以及应激信号（缺氧、氧化应激等），通过激活下游一系列信号通路，精确调节细胞的生物学行为。

在细胞生长方面，mTOR可以促进核糖体的生物合成和蛋白质翻译过程，增加细胞内蛋白质的含量，从而为细胞的生长提供物质基础。在细胞增殖过程中，mTOR信号通路能够调控细胞周期相关蛋白的表达和活性，推动细胞从G1期进入S期，促进细胞分裂和增殖。同时，mTOR还参与调节细胞的代谢过程，例如促进脂肪酸和胆固醇的合成，以满足细胞生长和增殖对脂质的需求；调节糖代谢途径，维持细胞的能量平衡。此外，mTOR在细胞自噬过程中也起着重要的负调控作用，当细胞处于营养缺乏或应激状态时，mTOR活性受到抑制，从而诱导自噬的发生，帮助细胞清除受损的细胞器和蛋白质聚集体，维持细胞内环境的稳定。

鉴于晶状体上皮细胞对晶状体正常功能维持的重要性，以及mTOR在细胞生命活动中的关键调控作用，深入研究mTOR与晶状体上皮细胞增殖和凋亡之间的关系具有重要的理论和实际意义。通过运用siRNA技术特异性地抑制mTOR的表达，能够深入探究mTOR在晶状体上皮细胞中的具体生物学功能和作用机制，为进一步理解白内障的发病机制提供全新的理论依据。同时，这一研究还有望为白内障的防治开辟新的策略和途径，例如以mTOR为潜在药物靶点，开发新型的治疗药物或干预手段，为广大白内障患者带来新的希望，具有重要的临床应用价值和社会意义。

1.2国内外研究现状

在晶状体上皮细胞的研究方面，国内外学者已取得了丰硕的成果。中山大学中山眼科中心刘奕志教授团队从全生命周期的角度，深入探究了晶状体上皮细胞在晶状体胚胎发育、透明性维持与创伤修复不同过程中的重要作用。研究发现，在胚胎期，表皮外胚层的单层细胞形成晶状体泡，后部和赤道部的晶状体上皮细胞通过一系列复杂的生物学过程分别形成初级和次级晶状体纤维，前部晶状体上皮细胞则分化扩增形成上皮层，且部分细胞保留分化为纤维细胞的能力，任何基因或环境因素的干扰都可能导致晶状体发育异常。而在晶状体成熟后，前囊下和赤道部的晶状体上皮细胞通过物质合成与交换、缓慢的增殖分化维持晶状体稳态，其形成的晶状体微循环对维持晶状体正常代谢和功能至关重要，一旦出现异常就可能引发白内障。此外，对于晶状体手术后晶状体上皮细胞增殖分化特性的研究，也为临床治疗提供了新的思路和方法。

在mTOR的研究领域，国内外学者对其在细胞生长、增