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第2章细胞工程第2节动物细胞工程(第一课时)
细胞工程大单元知识网络
从社会中来在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。思考:1.人造皮肤异体移植面临的问题:免疫排斥问题2.获得大量的自体健康皮肤的方法:取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养;皮肤干细胞培养(研究中)
核心素养学习目标1.从“稳态和平衡观”的角度分析动物细胞培养需要满足的基本的条件(生命观念)2.简述动物细胞培养的流程(科学思维)3.能说出干细胞的类型以及分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险(社会责任)
活动一:请结合课本P44内容,思考以下问题(2分钟)1.动物细胞培养所用培养基从成分来源划分是什么类型?从物理性质划分呢?2.如何维持无菌、无毒的环境?3.适宜的温度、pH分别是多少?适宜的渗透压的目的是什么?4.适宜的气体环境包括?分别有什么作用?如何保持该气体环境?糖类、氨基酸、无机盐、维生素……适宜的温度、pH、渗透压无菌、无毒的环境适宜的气体环境任务一、动物细胞培养的条件结合选择性必修一所学内容联系人体细胞生活的内环境,请你说出动物细胞培养需要哪些条件?
6糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境①培养液、培养用具:灭菌处理;②无菌操作;③适量添加抗生素定期更换培养液,以便清除代谢物。①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜;②适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为___________;③适宜的渗透压:维持细胞正常的形态和功能。36.5±0.5℃7.2-7.4合成培养基加血清,液体培养基任务一、动物细胞培养的条件血清中含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质
活动二:阅读教材P44-45“动物细胞培养的过程”,小组合作完成下列问题(3分钟)1.请用文字和箭头表示动物细胞培养的流程2.培养前,使用什么方法将组织分散成单个细胞?3.体外培养动物细胞可以分成哪些类型?4.什么是细胞贴壁?什么是接触抑制?5.什么是原代培养和传代培养?6.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?7.在此基础上归纳出动物细胞培养的概念和原理。传代培养取动物组织分散成单个细胞细胞悬液原代培养任务二、动物细胞培养的过程
动物细胞培养的过程取动物组织分散成单个细胞解决悬浮生长贴壁生长(大多数)细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等接触抑制传代培养用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理细胞悬液原代培养分瓶培养①细胞贴壁:某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖,这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。②接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象。③原代培养:指动物组织经处理后的初次培养。④传代培养:分瓶后的细胞培养。加培养液在培养皿或培养瓶内悬浮培养的细胞:直接用离心法收集贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞,用离心法收集细胞分裂受阻②制成细胞悬液,分瓶培养①收集细胞概念?原理?背诵1分钟
【疑难突破】1.(P44旁栏)进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?2.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢?用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,所以用胃蛋白酶不行。①细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖;②分散有利于与培养液充分接触,保证O2与营养供应和代谢物及时排出。
3.动物细胞的整个培养过程中两次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶的目的分别是什么?4.幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较,分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较,哪些细胞更易于培养?为什么?第一次使用的目的是使组织细胞分散开;贴壁细胞传代培养时使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来,分散成单个细胞,便于分瓶后继续培养。幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更易培养,原因是这些细胞分化程度低,分裂能力强。【疑难突破】
思考:“细胞增殖到互相接触的时候,糖蛋白识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖,出现接触抑制的现象”试结合上述解释,举例说明哪种细胞无接触抑制现象,并阐述原因。癌细胞;癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少。细胞贴壁、接触抑制瓶壁上的细胞层数是:一层(或单层)癌变细胞没有接触抑制现象,可以在培养瓶中形成多层细胞任务二、动物细胞培养的过程
下列关于动物细胞培养的叙述,错误的是()A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.选用胰蛋白酶处理细胞时,可能会对动物细胞造
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