生物化学之核酸的生物合成.pptxVIP

第十四章核酸的生物合成nucleicacidbiosynthesis

ADNA的生物合成RNA的生物合成B本章主要内容

第一节DNA的生物合成

中心法则（centraldogma传信息传递方向的规律基因表达：是指将遗传信息由DNA转录为RNA、再翻译成蛋白质的过程

复制（replication）DNA复制的基本原则半保留复制复制起始点（ori)双向复制半不连续复制12

半保留复制

semiconservativereplicationAGAACTTAGTCTTGAATCAGAACTTAGTCTTGAATCAGAACTTAGTCTTGAATC亲代子代

DNA半保留复制的实验

双向复制从复制起始点向2个方向进行双向复制

冈崎片段半不连续复制（semidiscontinousreplication)

解旋、解链酶类DNA拓扑异构酶解链酶单链结合蛋白01引物酶02DNA聚合酶03DNA连接酶04（二）参与DNA复制的主要酶类

1、解旋、解链酶类解链酶(helicase)解开DNA双链中氢键，消耗ATP单链结合蛋白（single-strandedDNA-bindingprotein）与单链DNA结合，保持模板处于单链状态，保护复制中的DNA单链不被核酸酶降解。DNA拓扑异构酶（topoisomerase)复制前：松弛DNA超螺旋，克服扭结现象复制后：TopoII作用下，重新引入超螺旋（需ATP供能）

解链酶DNA拓朴异构酶单链DNA结合蛋白SSB解开、理顺DNA链、维持DNA单链状

引物酶催化合成引物（primer)04引物酶与多种起始蛋白结合形成引发体03引物RNA3’-OH末端作为DNA合成的起始点02DNA聚合酶合成新DNA时需要引物（一小段RNA）012、引物酶(primase)

3、DNA聚合酶（DNApolymerase)DNA聚合酶的作用特点：模板：解开的DNA双链催化底物（dATP、dGTP、dCTP、dTTP）聚合形成3′,5′磷酸二酯键新链延长方向5/→3/具核酸外切酶活性0103020405

原核DNA聚合酶①polⅠ：3′→5′外切酶活性，参与DNA修复校正5′→3′外切酶、聚合酶活性，切除引物并填补空隙具有切口平移作用②polⅡ：生理功能尚不清楚，无酶Ⅰ、Ⅱ时起作用③polⅢ：复制延长中真正起复制作用的酶具3/-5/核酸外切酶活性，校正作用

DNA模板指导正确选择碱基配对校读功能DNA复制高保真性的机制

通过3/，5/-磷酸二酯键连接互补链中DNA片段不能连接单独存在的DNA或RNA单链。DNA连接酶(DNAligase)

（三）DNA的复制过程模板DNA解旋与解链，形成复制叉；形成引发体，合成RNA引物；按A=T、G=C碱基配对规则，合成DNA；切除引物、填补空隙、形成冈崎片段；DNA连接酶连接封口，形成长链DNA；在Tus蛋白参与下，终止复制。(terminusutilizationsubstance)

DNA复制示意图拓扑异构酶解链酶5/3/3/5/3/5/DNA聚合酶Ⅲ单链结合蛋白DNA聚合酶Ⅰ前导链随后链DNA连接酶冈崎片段引物酶

概念：以RNA为模板合成DNA的过程酶：逆转录酶依赖RNA的DNA聚合酶功能RNaseH功能（水解RNA-DNA杂交链）依赖DNA的DNA聚合酶功能逆转录(reversetranscription)020103050604

逆转录酶----------------------------------------RNaseH----------------------------------------+----------------------------------------------------------------------------------------------------------------cDNA整合入宿主细胞DNA分子中病毒RNARNA-cDNA杂交体cDNA双股cDNA宿主细胞DNA分子整合了cDNA的宿主细胞DNA分子逆转录酶意义：对中心法则的补充有助于基因工程的实施逆转录过程

HIV生活史

三、DNA复制与端粒、端粒酶端粒:是由蛋白质和DNA紧密结合的结构端粒酶:是一种自身携带模板RNA的逆转录酶端粒酶特殊的生物学功能：1.端粒酶活性与遗传信息的稳定性；2.端粒酶活性与细胞衰老；3.端粒酶活性与肿