色谱概论和经典液相色谱.pptVIP

第1页，共39页，星期日，2025年，2月5日图示固定相——CaCO3颗粒流动相——石油醚色带第2页，共39页，星期日，2025年，2月5日二、色谱法定义、实质和目的

定义：利用物质的物理化学性质建立的分离、分析方法实质：分离目的：定性分析或定量分析三、分类：1．按两相分子的聚集状态分：流动相固定相类型液相色谱液体固体液-固色谱液体液体液-液色谱气体固体气-固色谱气体液体气-液色谱气相色谱第3页，共39页，星期日，2025年，2月5日续前2．按固定相的固定方式分：3．按分离机制分：平面色谱纸色谱薄层色谱高分子薄膜色谱柱色谱填充柱色谱毛细管柱色谱分配色谱：利用分配系数的不同吸附色谱：利用物理吸附性能的差异离子交换色谱：利用离子交换原理空间排阻色谱：利用排阻作用力的不同第4页，共39页，星期日，2025年，2月5日图示色谱法简单分类第5页，共39页，星期日，2025年，2月5日四、色谱法的特点优点：“三高”、“一快”、“一广”缺点：高选择性——可将性质相似的组分分开高效能——反复多次利用组分性质的差异产生很好分离效果高灵敏度——10-11~10-13g，适于痕量分析分析速度快——几~几十分钟完成分离一次可以测多种样品应用范围广——气体，液体、固体物质化学衍生化再色谱分离、分析对未知物分析的定性专属性差需要与其他分析方法联用(GC-MS,LC-MS)第6页，共39页，星期日，2025年，2月5日第二节色谱过程与术语一、色谱过程、分离原理及特点二、基本类型色谱法的分离机制三、分配系数与保留行为的关系第7页，共39页，星期日，2025年，2月5日一、色谱过程、分离原理及特点（一）色谱过程指被分离组分在两相中的“分配”平衡过程以吸附色谱为例见图示吸附→解吸→再吸附→再解吸→反复多次洗脱→被测组分分配系数不同→差速迁移→分离第8页，共39页，星期日，2025年，2月5日图示分配系数的微小差异→吸附能力的微小差异微小差异积累→较大差异→吸附能力弱的组分先流出；吸附能力强的组分后流出back第9页，共39页，星期日，2025年，2月5日续前（二）色谱分离原理色谱分离基于各组分在两相之间平衡分配的差异，平衡分配可以用分配系数和分配比来衡量（三）色谱分离特点1．不同组分通过色谱柱时的迁移速度不等→提供了分离的可能性2．各组分沿柱子扩散分布→峰宽↑→不利于不同组分分离第10页，共39页，星期日，2025年，2月5日二、分配系数与保留行为的关系（一）基本术语色谱（1）基线：当没有待测组分进入检测器时，反映检测器噪音随时间变化的曲线（稳定—平直直线）（2）峰高：色谱峰与基线之间垂直的距离，用h表示。第11页，共39页，星期日，2025年，2月5日峰宽W：正态分布色谱曲线两拐点切线与基线相交的截距标准差σ：正态分布色谱曲线两拐点距离的一半σ→对应0.607h处峰宽的一半注：σ↓小，峰↓窄，柱效↑高半峰宽W1/2：峰高一半处所对应的峰宽注：除了用于衡量柱效，还可以计算峰面积第12页，共39页，星期日，2025年，2月5日图示第13页，共39页，星期日，2025年，2月5日2.保留值(1)．保留时间tR：从进样开始到某组分色谱峰顶（浓度极大点）的时间，即组分在色谱柱中的停留时间或组分流经色谱柱所需要的时间。(2)．死时间t0或tm：分配系数为零的组分的保留时间，即组分在流动相中的停留时间或流动相流经色谱柱所需要的时间（又称流动相保留时间）。