培养基的制备和高压蒸汽灭菌.pptVIP

培养基的制备和高压蒸汽灭菌第1页，共19页，星期日，2025年，2月5日目的与要求1、了解培养基的配制原理，掌握制备培养基的过程。2、学习高压蒸汽灭菌操作技术。3、初步掌握划线和涂布平板的技术。4、了解抗生素对细菌的抑制作用。第2页，共19页，星期日，2025年，2月5日配培养基灭菌、倒平板划线、涂布平板抑菌圈实验实验流程第3页，共19页，星期日，2025年，2月5日任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理培养基培养基（medium)：由人工配制的适合微生物生长、繁殖或适合积累代谢产物的营养基质。在微生物学研究和生长实践中，配置合适的培养基是一项最基本的要求。第4页，共19页，星期日，2025年，2月5日培养基按化学成分来分类按物理状态来分类按功能进行分类天然培养基合成培养基半合成培养基固体培养基液体培养基半固体培养基脱水培养基基础（本）培养基营养（加富）培养基完全培养基选择培养基鉴别培养基第5页，共19页，星期日，2025年，2月5日培养基的配制过程计算用量:200ml固体培养基称量：托盘天平溶解：自来水调pH：自然pH灭菌：一般培养基，1210C,15-30min：20min；含糖培养基：1120C,15-30min；易产生沉淀的物质：分别灭菌后再混合倒平板3g/L牛肉膏10g/L蛋白胨5g/LNaCl2%琼脂粉第6页，共19页，星期日，2025年，2月5日灭菌灭菌（Sterilization）是指利用物理、化学等手段杀灭一切微生物的营养体、芽孢和孢子的过程。第7页，共19页，星期日，2025年，2月5日灭菌方法化学药品灭菌辐射灭菌过滤除菌加热法干热灭菌湿热灭菌火焰灼烧热空气灭菌煮沸消毒法常压蒸汽灭菌法高压蒸汽法第8页，共19页，星期日，2025年，2月5日高压蒸汽灭菌锅的构造Becareful!第9页，共19页，星期日，2025年，2月5日高压蒸汽灭菌锅的使用待灭菌物品的包扎装锅、加水加盖（对角线均匀拧旋）升温、排气（放大气5min）恒温切断电源、冷却开锅取物121℃20minAttention!第10页，共19页，星期日，2025年，2月5日倒平板融化的琼脂培养基,冷却至50℃左右(以手背能忍受的温度为准)第11页，共19页，星期日，2025年，2月5日平板划线的基本程序灭菌接种环沾取菌液接种灭菌接种环杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境第12页，共19页，星期日，2025年，2月5日连续划线法第13页，共19页，星期日，2025年，2月5日灭菌过的移液管吸取菌液0.1ml滴在培养皿中央用灭菌的涂布棒均匀涂布：将菌悬液先沿一条直线轻轻地来回推动,使之分布均匀，然后改变方向沿另一垂直来回推动，平板内边缘处可改变方向用三角玻扒再涂布几次。三角铁扒平板涂布的基本程序第14页，共19页，星期日，2025年，2月5日涂布好的平板滤纸片抑菌圈实验青霉素第15页，共19页，星期日，2025年，2月5日**应用能杀死微生物的化学制剂进行灭菌的方法：医疗卫生、环境保护、食品、生物制品应用物理射线进行灭菌的方法：无菌室、实验台等物体表面应用过滤介质进行灭菌的方法：血清、抗生素、糖等不耐热的的液体应用高温进行灭菌的方法平板的制作应在酒精灯火焰旁进行，右手掌心握住三角瓶的底部，左手打开三角瓶棉塞，以右手的无名指和末指夹持瓶塞，灼烧瓶口。左手拿培养皿，用左手的大拇子将皿盖掀开一缝，至瓶口刚好伸入，向皿内注入培养基（约15ml，厚度约0.5mL左右），迅速盖好皿盖。左手持培养皿稍加旋转摇动，使培养基均匀分布于整个培养皿底部，然后平置于桌面水平位置,待凝后即为平板。