低温脂肪酶产生菌的筛选、表达及酶学性质分析.pdfVIP

第

45

卷

第

20

期食品工业科技Vol.

45

No.

20

2024

年

10

月Science

and

Technology

of

Food

IndustryOct.

2024

许琳琳，刘慧乾，张梦瑶，等.

低温脂肪酶产生菌的筛选、表达及酶学性质分析[J].

食品工业科技，2024，45（20）：133−140.

doi:

10.13386/j.issn1002-0306.2023110093

XU

Linlin,

LIU

Huiqian,

ZHANG

Mengyao,

et

al.

Screening,

Expression

and

Analysis

of

Enzymatic

Properties

of

a

Cold-active

Lipase-producing

Strain[J].

Science

and

Technology

of

Food

Industry,

2024,

45(20):

133−140.

(in

Chinese

with

English

abstract).

doi:

10.13386/j.issn1002-0306.2023110093

·

生物工程

·

低温脂肪酶产生菌的筛选、表达及酶学

性质分析

1111121,2,*

许琳琳，刘慧乾，张梦瑶，张慧静，李家兴，戚晨晨，王成涛

（1.老年营养与健康教育部重点实验室（北京工商大学），北京市食品添加剂工程技术研究中心

（北京工商大学），北京

100048；

2.新疆新康农业发展有限公司，新疆乌鲁木齐

830032）

摘要：为筛选高产低温脂肪酶的菌株，并为脂肪酶的工业化开发提供生产资料。利用罗丹明B培养法从漠河县兴

安落叶松林为主的林下土壤中分离出1株低温脂肪酶产生菌，对其形态学、生理生化特性进行鉴定，并结合16S

rDNA基因序列，确定该菌株为苏云金芽孢杆菌（Bacillusthuringiensis）。以苏云金芽孢杆菌基因组为模板克隆脂

肪酶基因Lip240，对Lip240进行异源表达以及酶学性质的分析。结果表明：该重组脂肪酶Lip240的最适反应温

2+

度为30

℃，在4~30

℃条件下处理6

h能维持60%以上的活性，是一种低温脂肪酶，最适pH为8.0。Ca、

2+2+3+3+

Mn、Fe、Fe和Cr对脂肪酶Lip240的酶活有一定的促进作用。该酶具有较好的有机溶剂耐受性，SDS能够显

著（P0.05）抑制脂肪酶Lip240的酶活。该酶更偏好于水解中短链底物。该结论可为微生物资源开发利用和低温

脂肪酶的工业应用提供一定的理论依据。

关键词：低温脂肪酶，苏云金芽孢杆菌，基因克隆，异源表达，酶学性质

中图分类号