核酸化学与核苷酸代谢.pptVIP

2个短反馈IMPAMPSXMPAMPADPGMPGDPGTPATPATPGTP第94页，共133页，星期日，2025年，2月5日⑵介质中的离子强度离子强度低Tm值低变性温度范围较宽离子强度大Tm值高变性温度范围较窄第62页，共133页，星期日，2025年，2月5日ＲＮＡ的变性双链的RNA分子RNA-DNA杂化分子可变性中性pH条件下，三者Tm值大小为：双链RNA分子RNA-DNA杂化分子DNA分子第63页，共133页，星期日，2025年，2月5日(二)核酸的复性DNA热变性后的复性,常常称为退火。变性的DNA或RNA在去除变性因素并处于适当的条件下，又可重新结合成为双螺旋结构这一过程称为复性。1.概念彼此分离的双链2.复性过程两种情况第64页，共133页，星期日，2025年，2月5日（1）两条完全分开的单链通过随机碰撞形成互补短片段的双螺旋。（2）尚未配对的碱基很快地“对齐”。迅速形成双链直至双螺旋结构。第65页，共133页，星期日，2025年，2月5日复性后ＤＮＡ分子性质一系列的理化性质随即恢复d.生物活性部分恢复a.260nm处的紫外吸收值下降b.粘度上升c.浮力、密度降低（减色效应）第66页，共133页，星期日，2025年，2月5日(三)核酸分子杂交在一定条件下（适宜的温度、pH及离子强度），可按碱基互补原则复性形成双链，此过程称为核酸分子杂交。1.概念具有一定同源性的两条核酸单链，变性复性第67页，共133页，星期日，2025年，2月5日不完全同源核酸单链分子杂交突环第68页，共133页，星期日，2025年，2月5日2.可发生杂交的核酸分子(1)两条同源的DNA链(2)两条同源的RNA链(3)一条DNA链一条RNA链3.核酸杂交的应用（1）测定核酸分子碱基组成（2）检测某些因基因突变引起的疾病第69页，共133页，星期日，2025年，2月5日核酸酶指所有可以水解核酸的酶。一、分类1.按照作用底物的不同分DNA酶（DNase):水解DNARNA酶（RNase):水解RNA2.按照作用的部位分核酸外切酶：作用于5′或3′末端核酸内切酶：作用于链的内部第70页，共133页，星期日，2025年，2月5日二、限制性核酸内切酶作用于链的内部，具有严格序列依赖性。切——基因工程的手术刀没有限制性内切酶的发现和应用，就很难有今天分子生物学与基因工程的快速发展。功能：根据需要在特定的位点精确切割双链DNA分子是基因工程中最常用的工具酶之一。第71页，共133页，星期日，2025年，2月5日核苷酸库核酸的降解核苷酸的合成核酸的合成核苷酸的降解核苷酸是核酸的基本结构单位，它不属于营养必需物质核苷酸代谢概述第72页，共133页，星期日，2025年，2月5日食物核蛋白蛋白质核酸(RNA与DNA)胰核酸酶RNA酶DNA酶(磷酸二酯酶)单核苷酸胰、肠核苷酸酶(磷酸单酯酶)核苷磷酸核苷酶(水解或磷酸解)戊糖或磷酸戊糖碱基核酸的消化排出，很少利用第73页，共133页，星期日，2025年，2月5日核苷酸的生理功用作为核酸合成的原料----最主要的功能体内能量的利用形式参与代谢与生理调节----cAMP,cGMP组成辅酶----NAD,FAD,CoA活化中间代谢物---UDPG,CDP-DG,SAMATP----主要形式；GTP----蛋白质合成UTP----糖原合成；CTP----磷脂合成利用本章知识，评价“珍奥核酸”的功能第74页，共133页，星期日，2025年，2月5日第一节嘌呤核苷酸代谢一、嘌呤核苷酸的合成代谢(一)嘌呤核苷酸的从头合成(二)嘌呤核苷酸的补救合成(三)嘌呤核苷酸的相互转变(四)脱氧(核酸)核苷酸的生成(五)嘌呤核苷酸的抗代谢物二、嘌呤核苷酸的分解代谢第75页，共133页，星期日，2025年，2月5日一、嘌呤核苷酸的合成代谢(一)、从头合成途径1.概念：用磷酸核糖、氨基酸、一碳单位及CO2等简单物质为原料，经过一系列酶促反应合成嘌呤核苷酸的途径.2.原料：5－磷酸核糖、谷氨酰胺、一碳单位、甘氨酸、CO2、天冬氨酸第76页，共133页，星期日，2025年，2月5日N1C2N3C4C5C6N97NC8甲酰基(一碳单位)甘氨酸CO2Asp甲酰基(一