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北京pcr上岗证考试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性B.复性C.延伸D.转录

答案：D

2.Taq酶的特点是（）

A.耐高温B.耐低温C.催化DNA合成D.A和C

答案：D

3.引物设计时，其长度一般为（）

A.10-15bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp

答案：B

4.PCR反应体系中，不需要的成分是（）

A.dNTPB.模板DNAC.限制性内切酶D.引物

答案：C

5.以下哪种物质可以作为PCR反应的模板（）

A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.DNA

答案：D

6.提高PCR反应特异性的方法不包括（）

A.优化引物设计B.提高退火温度C.增加模板量D.使用热启动Taq酶

答案：C

7.PCR技术的发明人是（）

A.克里克B.穆利斯C.沃森D.桑格

答案：B

8.一个典型的PCR反应循环包括（）

A.一次变性、一次复性、一次延伸

B.多次变性、多次复性、多次延伸

C.一次变性、多次复性、多次延伸

D.多次变性、一次复性、一次延伸

答案：B

9.在PCR反应中，决定扩增片段特异性的是（）

A.Taq酶B.引物C.dNTPD.模板

答案：B

10.以下关于PCR产物检测的方法，最常用的是（）

A.分光光度法B.荧光定量法C.琼脂糖凝胶电泳D.高效液相色谱法

答案：C

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的影响因素包括（）

A.模板浓度B.引物质量C.Taq酶活性D.反应缓冲液成分

答案：ABCD

2.引物设计的原则包括（）

A.避免引物自身互补B.引物长度适宜

C.引物GC含量合理D.引物3’端避免错配

答案：ABCD

3.下列哪些物质可用于PCR反应体系（）

A.Mg2+B.KClC.牛血清白蛋白D.DMSO

答案：ABCD

4.荧光定量PCR的优点有（）

A.定量准确B.灵敏度高C.能检测微量核酸D.可实时监测反应进程

答案：ABCD

5.PCR技术可应用于（）

A.基因诊断B.基因克隆C.法医鉴定D.物种鉴定

答案：ABCD

6.热启动PCR的作用包括（）

A.提高反应特异性B.减少非特异性扩增

C.提高扩增效率D.降低引物二聚体形成

答案：ABD

7.以下属于PCR反应过程中可能出现的问题有（）

A.假阳性结果B.假阴性结果C.扩增效率低D.引物二聚体形成

答案：ABCD

8.实时荧光定量PCR常用的荧光化学物质有（）

A.SYBRGreenIB.TaqMan探针C.分子信标D.荧光素

答案：ABC

9.在PCR实验中，需要注意的事项有（）

A.防止交叉污染B.准确配制反应体系

C.控制反应条件D.正确保存实验试剂

答案：ABCD

10.巢式PCR的优点是（）

A.提高灵敏度B.提高特异性C.降低假阳性D.适用于低拷贝模板

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，模板DNA的量越多越好。（×）

2.Taq酶具有3’→5’外切酶活性。（×）

3.引物的GC含量越高，退火温度越高。（√）

4.荧光定量PCR可以对核酸进行绝对定量和相对定量。（√）

5.PCR技术只能扩增已知序列的DNA片段。（×）

6.在PCR反应体系中，dNTP的浓度越高越好。（×）

7.复性温度是影响PCR反应特异性的关键因素之一。（√）

8.引物二聚体的形成不影响PCR反应结果。（×）

9.热启动PCR可以完全消除非特异性扩增。（×）

10.PCR产物的大小由引物决定。（√）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本原理。

答案：PCR基于DNA半保留复制原理。通过高温使模板DNA变性解链，低温时引物与模板复性结合，在适宜温度下Taq酶以dNTP为原料，从引物3’端延伸合成新的DNA链，经多轮循环实现特定DNA片段的大量扩增。

2.简述引物设计的要点。

答案：长度1