实验-大肠杆菌的培养和分离讲课文档.pptVIP

实验-大肠杆菌的培养和分离讲课文档.ppt

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实验-大肠杆菌的培养和分离;什么是培养基?;培养基的配制;LB培养基的配制;菌落:单细菌的克隆;菌落的作用:鉴定菌种的重要依据;大肠杆菌;怎样无菌操作?;培养皿;棉花塞、封口膜、牛皮纸或旧报纸、橡皮筋;酒精灯和酒精棉球;超净工作台;用细菌过滤器除菌:尿素加热会分解,用G6玻璃砂漏斗过滤。;什么是倒平板?;Step1:培养基的配制和灭菌;Step2:倒平板;Step3:接种后扩大培养;Step4:平板划线分离;怎样在平板上划线?;;原因:既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基中造成污染。;Step5:菌种的斜面保存;试管斜面培养基的制作;平板划线分离法;②接种环冷却后,蘸取带菌培养物;③在近火焰处,让带菌接种环在固体培养

基上划线;④恒温培养箱中倒置培养;稀释涂布分离法;②滴加菌液;③用玻璃刮刀涂布;③将玻璃刮刀放在酒精灯火焰上灼烧,待玻璃刮刀冷却后,在酒精灯旁打开培养皿,将菌液涂布到整个培养基表面。;④将培养皿倒置,在37℃恒温箱中培养24~48h。;结果:以每个培养皿中有20个以内的单菌落最为合适。;第34页,共37页。;倒平板;例题:要获得遗传特性单一的大肠杆菌菌种,一般必须对原有的大肠杆菌菌种进行扩大培养,并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离实验的相关问题:

(1)对买回来的大肠杆菌菌种进行扩大培养,一般用LB培养基,在培养基中为微生物提供碳源、氮源和能源的物质主要是,为调节渗透压,要加入一定量的。为进行大肠杆菌的分离,还要加入配制成固体培养基,并进行倒平板的操作。;谢谢大家!

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