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风湿宁联合MTX对RA滑膜成纤维细胞Treg/Th17免疫平衡的调节机制研究

一、引言

1.1研究背景与意义

类风湿性关节炎（RheumatoidArthritis，RA）是一种常见的慢性炎症性自身免疫疾病，全球发病率约为0.5%-1%，我国大陆地区RA发病率约为0.42%，患者人数超500万。RA主要特征为多关节的进行性损害，基本病理改变是滑膜炎，血管翳形成并逐渐出现关节软骨和骨质的破坏，最终可能导致关节畸形和功能丧失，严重影响患者生活质量。除关节症状外，还可并发贫血、胸膜炎、心包炎等，增加患者死亡率。此外，由于长期患病，患者易出现情绪抑郁，丧失社交能力，同时因丧失工作能力导致经济损失，给家庭和社会带来沉重负担。

在RA的发病机制中，Treg/Th17免疫平衡起着关键作用。调节性T细胞（Treg）通过释放抑制性细胞因子如IL-10和TGF-β等，抑制免疫反应，维持免疫稳态。辅助性T细胞17（Th17）则主要分泌IL-17等促炎细胞因子，促进炎症反应。正常情况下，Treg和Th17细胞处于动态平衡，共同维持机体免疫稳定。而在RA患者中，这种平衡被打破，Th17细胞功能亢进，Treg细胞功能相对不足，Th17/Treg比例失衡，导致大量促炎细胞因子释放，引发滑膜炎症和关节损伤。研究表明，RA患者外周血和关节滑膜组织中Th17细胞比例明显升高，Treg细胞比例降低，且Th17/Treg比值与疾病活动度密切相关。

甲氨蝶呤（MTX）是目前临床治疗RA的基本用药，属于改善病情抗风湿药（DMARDs）。它通过抑制二氢叶酸还原酶，阻止叶酸还原为四氢叶酸，从而干扰嘌呤和嘧啶的合成，抑制细胞增殖和免疫反应，可有效缓解RA患者的关节症状，延缓关节破坏。然而，MTX存在一定局限性，部分患者对其反应不佳，且长期使用可能出现胃肠道不适、肝肾功能损害、骨髓抑制等不良反应，限制了其临床应用。

风湿宁是针对RA发病特征研制的纯中药制剂，由两面针、七叶莲、宽筋藤等六味中药组成，具有祛风止痛、活血化瘀、舒筋活络等多重作用。中医认为RA属于“痹证”范畴，主要因风、寒、湿、热等外邪侵袭人体，闭阻经络，气血运行不畅所致。风湿宁中的中药成分可针对这些病因发挥协同作用，调节机体免疫功能，减轻炎症反应。研究显示，风湿宁在改善RA患者临床症状方面有一定效果，能减轻关节疼痛、肿胀，提高患者生活质量。但目前关于风湿宁单独使用的研究有限，其作用机制尚未完全明确。

基于以上背景，探讨风湿宁联合MTX对RA滑膜成纤维细胞Treg/Th17免疫平衡的影响具有重要意义。通过研究，一方面可深入了解两者联合治疗RA的作用机制，为临床治疗提供更坚实的理论依据；另一方面，有望为RA患者提供更有效、安全的治疗方案，提高治疗效果，减少不良反应，改善患者预后，降低致残率，减轻社会经济负担。

1.2研究目的

本研究旨在探究风湿宁联合MTX对RA滑膜成纤维细胞Treg/Th17免疫平衡的影响，具体目标如下：

观察风湿宁、MTX单独及联合作用下，RA滑膜成纤维细胞的增殖情况，明确两者联合对细胞增殖的影响，判断是否具有协同抑制作用。

检测各组细胞中Treg相关因子（如IL-10、Foxp3等）和Th17相关因子（如IL-17、ROR-γt等）在mRNA和蛋白水平的表达变化，从分子层面揭示风湿宁联合MTX对Treg/Th17免疫平衡的调节机制。

通过本研究，为风湿宁联合MTX治疗RA提供实验依据，优化临床治疗方案，提高RA的治疗效果，为患者带来更好的治疗选择。

1.3国内外研究现状

在类风湿性关节炎（RA）的研究领域，国内外学者围绕疾病机制、治疗方法等展开了大量研究。

国外方面，对RA发病机制的研究不断深入，明确了Treg/Th17免疫失衡在其中的关键作用。有研究表明，在RA患者的关节滑膜组织和外周血中，Th17细胞比例显著升高，分泌的IL-17等促炎细胞因子增多，引发滑膜炎症和关节损伤；而Treg细胞数量减少或功能受损，无法有效抑制免疫反应，导致Th17/Treg平衡失调。在治疗上，以甲氨蝶呤（MTX）为代表的改善病情抗风湿药（DMARDs）是常用药物。MTX通过抑制二氢叶酸还原酶，干扰细胞代谢和增殖，从而发挥抗炎和免疫抑制作用。此外，生物制剂如肿瘤坏死因子（TNF）抑制剂、白细胞介素-6（IL-6）受体拮抗剂等也广泛应用于临床，针对特定细胞因子或信号通路，取得了较好的疗效。然而，生物制剂价格昂贵，且存在感染、过敏等不良反应，限制了其普及。

国内研究在RA方面同样取得了诸多成果。中医中药在RA