HER2基因扩增检测试剂盒说明书.pptxVIP

HER2基因扩增检测试剂盒说明书

汇报人：XXX

2025-X-X

目录

1.产品概述

2.检测原理

3.产品组成

4.操作步骤

5.质量保证

6.注意事项

7.技术支持

01

产品概述

产品名称及规格

试剂盒型号

本试剂盒型号为HER2-FQ-PK，适用于检测HER2基因扩增情况。

检测范围

本试剂盒可检测HER2基因的扩增情况，适用于多种癌症类型，如乳腺癌、卵巢癌等，检测灵敏度高达0.1%.

试剂规格

试剂盒包含多种试剂，如DNA提取试剂、PCR试剂、荧光染料等，规格分别为50人份、100人份、200人份，满足不同实验室的需求。

产品用途

癌症诊断

本试剂盒可用于乳腺癌等癌症的早期诊断，通过检测HER2基因的扩增情况，辅助医生判断患者病情。

疗效监测

在癌症治疗过程中，本试剂盒可用于监测治疗效果，根据HER2基因扩增情况调整治疗方案，提高治疗效果。

预后评估

本试剂盒有助于评估患者预后，通过HER2基因扩增水平预测患者复发风险，为临床治疗提供重要参考。

产品原理

PCR技术

本试剂盒基于荧光定量PCR技术，利用特异性引物和探针，对HER2基因进行扩增，并通过荧光信号检测扩增效率。

双链DNA断裂

HER2基因扩增导致其编码的蛋白过度表达，与肿瘤细胞的生长和转移密切相关。本试剂盒通过检测HER2基因拷贝数，反映基因扩增情况。

荧光定量分析

本试剂盒采用荧光定量方法，通过比较目标DNA与内参DNA的荧光信号强度，实现HER2基因扩增的定量分析，灵敏度高，重复性好。

02

检测原理

荧光定量PCR技术

原理介绍

荧光定量PCR技术通过扩增DNA片段并实时监测荧光信号，实现基因表达水平的定量分析。该技术灵敏度高，可达fg级别。

技术优势

荧光定量PCR技术具有快速、准确、重复性好等优点，广泛应用于基因表达、病原体检测、基因突变分析等领域。

应用实例

在癌症研究领域，荧光定量PCR技术被用于检测肿瘤标志物，如HER2基因扩增，为临床诊断和治疗提供重要依据。

引物和探针设计

引物设计原则

引物设计遵循特异性、互补性、Tm值匹配等原则，确保与目标DNA序列精确匹配，避免非特异性扩增。

探针选择

探针采用荧光标记，位于引物之间，与目标DNA形成杂交，产生荧光信号。探针长度通常为18-25个碱基。

验证标准

引物和探针设计后需进行特异性、扩增效率和Tm值验证，确保PCR反应的准确性和稳定性。

扩增条件

循环参数

PCR扩增循环通常设置为94℃预变性2分钟，随后进行35个循环，每个循环包括94℃变性30秒，58℃退火30秒，72℃延伸30秒，最后72℃延伸7分钟以确保延伸完全。

退火温度

退火温度（Tm）设置在引物和探针结合的最佳温度，一般为引物GC含量影响，通常设定为50-60℃。

延伸温度

延伸温度设定为72℃，该温度有利于DNA聚合酶活性，保证PCR产物正确合成。

03

产品组成

试剂盒组成

PCR试剂

包含dNTPs、DNA聚合酶、缓冲液等，用于PCR反应的进行，确保扩增效率。

引物和探针

提供特异性引物和探针，用于靶基因的扩增和荧光定量检测，保证检测的准确性。

其他试剂

包括DNA提取试剂、去污剂、终止剂等，辅助实验操作，提高实验效率和安全性。

试剂规格

PCR试剂规格

PCR试剂包含dNTPs、DNA聚合酶等，规格为50人份、100人份、200人份，满足不同实验需求。

引物探针规格

引物和探针规格为50人份，包含特异性引物和荧光标记探针，确保检测的准确性和灵敏度。

辅助试剂规格

辅助试剂如DNA提取试剂、去污剂等，规格为50人份，方便实验室操作，提高实验效率。

设备要求

PCR仪要求

需要使用符合PCR扩增要求的仪器，如实时荧光定量PCR仪，具备自动温度控制功能，确保扩增反应的准确性。

离心机要求

实验过程中需要使用高速离心机，用于分离DNA提取过程中的杂质，保证DNA纯度。离心机转速应不低于12000rpm。

微量移液器要求

使用微量移液器进行试剂加样，精度要求高，通常使用10-1000μl范围，确保加样准确无误。

04

操作步骤

样本准备

样本采集

采集患者血液、组织或细胞样本，确保样本新鲜，避免长时间保存导致的DNA降解。采集量根据实验需求确定，一般不少于1ml。

DNA提取

使用DNA提取试剂盒提取样本中的DNA，提取过程需温和，避免高温或剧烈搅拌导致DNA断裂。提取的DNA浓度应达到20ng/μl以上。

DNA纯化

对提取的DNA进行纯化，去除杂质如蛋白质、RNA等，纯化后的DNA需进行电泳检测，确保无降解和杂质。

PCR反应

反应体系配制

根据PCR试剂说明书配制反应体系，通常包括模板DNA、引物、探针、dNTPs、DNA聚合酶等，总体积为25μl。

反应程序设置

设置PCR反应程序，包括预变性、变性