病毒的培养69课件.pptVIP

目录1.病毒的动物接种2.病毒的禽胚接种3.病毒的细胞培养1.病毒的动物接种传统病毒培养方法动物选择本种动物或易感实验动物（小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、犬、猴等）；健康、非免疫、SPF（无特定病原体）或GF（无菌）动物豚鼠小鼠家兔1.病毒的动物接种接种途径：（皮内、皮下、肌肉、脑内、静脉）注射口服、划痕、涂擦毛囊等病毒增殖结果观察：动物症状及病变；血清学或病原学检测用途：病原学检查、传染病诊断、疫苗生产等如：小鼠脑内接种分离流行性乙型脑炎病毒小鼠脑内接种小鼠出现神经症状分离流行性乙型脑炎病毒1.病毒的动物接种接种途径：（皮内、皮下、肌肉、脑内、静脉）注射口服、划痕、涂擦毛囊等病毒增殖结果观察：动物症状及病变；血清学或病原学检测用途：病原学检查、传染病诊断、疫苗生产等如：家兔耳缘静脉接种制备猪瘟兔化弱毒苗家兔耳缘静脉接种制备猪瘟脾淋苗禽源病毒（或某些特殊病毒）常用的培养方法禽胚选择：非免疫胚、SPF胚或GF胚一般条件允许时，最好选用白壳SPF禽胚SPF鸡胚2.病毒的禽胚接种病毒鸡胚接种部位示意图卵黄囊接种羊膜腔接种绒毛尿囊膜接种绒毛尿囊腔接种2.病毒的禽胚接种6～8日龄鸡胚，主要用于虫媒披膜病毒、鹦鹉热衣原体和立克次体等。9～12日龄鸡胚，主要用于正黏病毒和副黏病毒，如新城疫病毒。10～13日龄鸡胚，主要用于痘病毒和疱疹病毒，如鸡传染性喉气管炎病毒。10～11日龄鸡胚，主要用于正黏病毒和副黏病毒。接种途径：绒毛尿囊腔、绒毛尿囊膜、卵黄囊、羊膜腔病毒增殖结果判定：禽胚病变、病原学或血清学检测禽胚病变：禽胚死亡，胚体畸形，充血、出血或出现坏死灶，绒毛尿囊膜上出现痘斑等鸡传染性支气管炎病毒经鸡胚尿囊腔接种侏儒胚：鸡胚矮小、蜷缩呈球形（左图为正常对照）2.病毒的禽胚接种鸡胚全身出血、腹部膨大（右图为正常对照）鸡传染性法氏囊病病毒经鸡胚绒毛尿囊膜接种鸡胚绒尿膜水肿、出血（左图为正常对照）2.病毒的禽胚接种用途：家禽传染病的诊断、病毒病原性的研究及生产诊断抗原和疫苗等某疾控中心检验人员在做鸡胚接种实验诊断流感某生物工程公司用于制备流感疫苗的鸡胚用SPF鸡胚生产出的鸡新城疫活疫苗2.病毒的禽胚接种MDCK技术发展最快的培养方法细胞选择：易感细胞Vero（非洲绿猴肾细胞）、MDCK（犬肾上皮细胞）CEF（鸡胚成纤维细胞）、PK-15（猪肾上皮细胞）VeroC10083.病毒的细胞培养培养方法静置、旋转、悬浮、微载体培养3.病毒的细胞培养细胞旋转培养细胞静置培养培养方法培养瓶、培养板、培养皿培养3.病毒的细胞培养细胞瓶、板、皿培养SARS-CoV-2致细胞病变效应正常Vero-E6传代细胞Vero-E6传代细胞早期病变Vero-E6传代细胞晚期病变病毒增殖结果判定：细胞病变效应；病原学或血清学检测细胞病变效应（CPE）：病毒在细胞内增殖而引起细胞发生的病理改变，常见的形态学变化为：肿大、圆缩、聚集、融合、形成合胞体、脱落等。3.病毒的细胞培养细胞病变效应的观察病毒增殖结果判定：细胞病变效应；病原学或血清学检测细胞病变效应（CPE）：用相差显微镜进行观察3.病毒的细胞培养相差显微镜用于病毒学研究用途：病毒病诊断、病毒研究和疫苗生产等。3.病毒的细胞培养用于疫苗生产THANKS