病毒的鸡胚接种25课件.pptVIP

病毒的鸡胚接种病毒培养的宿主：本动物（例如：猪瘟病毒-猪）实验动物：家兔、小白鼠、大白鼠、豚鼠、鸡胚体外培养的活细胞在本试验中，采用的是鸡胚接种、培养新城疫病毒。一、实验目的

了解鸡胚的基本结构与功能；

掌握新城疫病毒的鸡胚尿囊腔接种法。

二、试验原理

鸡胚为活的动物机体，组织分化程度低，病毒易于增殖，可选择不同的日龄和接种途径，感染病毒的组织和液体中含大量病毒。

尿囊腔接种常用于流感病毒、新城疫病毒等的接种和培养。进入尿囊腔的这些病毒，能够在尿囊的内胚层细胞中大量繁殖，随后释放到尿囊液中。通过尿囊腔接种途径可获得大量的病毒。二、试验原理

鸡胚为活的动物机体，组织分化程度低，病毒易于增殖，可选择不同的日龄和接种途径，感染病毒的组织和液体中含大量病毒。

尿囊腔接种常用于流感病毒、新城疫病毒等的接种和培养。进入尿囊腔的这些病毒，能够在尿囊的内胚层细胞中大量繁殖，随后释放到尿囊液中。通过尿囊腔接种途径可获得大量的病毒。

三、材料

鸡新城疫病毒（NDV）、鸡胚（9-11日龄）、照蛋灯、蛋座、酒精棉球、碘酊棉球、酒精灯、打孔器、1mL注射器、石蜡、废物缸、孵卵箱四、鸡胚的结构与功能卵壳上有细孔，进行气体交换壳膜使气体分子和液体分子在内外两方面进行交换。气室呼吸和调节压力绒毛尿囊膜起胚胎呼吸器官的功能，氧气的交换是在膜的血管内通过卵壳孔而进行的。尿囊腔胚胎的排泄器官，内含有尿囊液，初为透明液体，以后尿囊液中尿酸盐迅速增加，胚胎发育到第12-13天后，尿囊液开始变得混浊。在本试验中，病毒的鸡胚接种部位在尿囊腔。羊膜与羊膜腔其中盛有羊水，胎体浸泡于其中卵黄在胚胎发育早期供给鸡胚营养。卵白在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。10日龄鸡胚的结构五、受精卵的选择最好是来自SPF鸡群，以降低母源抗体的影响。受精卵的壳最好是白色的。受精卵必须新鲜，保存在5-20℃不要超过10天，保存一个月的受精卵，孵化率将近于零。六、鸡胚孵育条件孵卵箱内的温度应保持在37.5-38.5℃相对湿度：50%-60%必须保证具有充分的新鲜空气流通，特别是在孵化5-6天以后。从孵育后第3天开始，每天翻蛋一次。七、鸡胚生长发育过程鸡胚从第1天开始孵育至第21天出壳，胚胎发育过程如图所示。孵育至第13天时，鸡胚开始长毛。在本试验中，使用的是9-11日龄的鸡胚。在发育的早期，鸡胚不易辨认，要到4－5天后才容易看见。因此，检卵要在孵育4－5天后进行，每天用照蛋灯检卵一次，检查鸡胚的存活情况。活胚：活的鸡胚绒毛尿囊膜界线较明显，上面的血管清晰可见、成网状，可看到明显的胚胎自主运动。死胚：血管模糊、变细、折断脱落，成淤血带或淤血块，没有胚动。八、照蛋检卵发育至第5天的鸡胚发育至第4天的鸡胚活胚：血管清晰