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以脱细胞猪小肠黏膜下层为支架构建组织工程角膜上皮的可行性探究

一、引言

1.1研究背景与意义

角膜作为眼睛最外层的透明组织，对于光线的折射和聚焦起着关键作用，是视觉形成的重要结构。一旦角膜发生病变，其透明度、形状或完整性遭到破坏，就可能引发视力下降甚至失明。据相关研究统计，全球范围内，角膜病是导致失明的主要原因之一，约有2000多万人因角膜病而失明。在我国，角膜病患者数量超过3000万，因角膜病致盲的患者达400多万，且这一数字还在逐年递增。如翼状胬肉作为常见的角膜疾病，全球患病率约为5.5%-21%，中国40岁以上人群患病率约为13.4%，患者数量将近1.09亿。

角膜上皮是角膜的最外层，它对于维持角膜的正常生理功能至关重要。角膜上皮不仅能抵御外界病原体的入侵，还能保持角膜的湿润和光滑，确保角膜的透明性。当角膜上皮受损或发生病变时，如持续性角膜上皮缺损、难治性角膜溃疡等，会严重影响角膜的功能，导致视力障碍，给患者的生活和工作带来极大的不便。目前，对于这些角膜上皮相关疾病，传统的治疗方法往往效果不佳，难以实现角膜上皮的有效重建和功能恢复。

角膜移植手术是治疗角膜病的重要手段之一，但该手术面临着供体材料来源严重匮乏的问题。由于我国国民受传统观念的影响，角膜捐献数量远远不能满足临床需求，大量患者因无法及时获得合适的角膜供体而错过最佳治疗时机，长期忍受着失明的痛苦。因此，寻找一种有效的替代材料来构建组织工程角膜上皮，成为解决角膜病治疗难题的关键。

脱细胞猪小肠黏膜下层（SIS）作为一种生物材料，近年来在组织工程领域受到了广泛关注。SIS来源于猪小肠黏膜下层，经过脱细胞处理后，去除了细胞成分，保留了细胞外基质的三维结构和生物活性成分，如胶原蛋白、弹性蛋白、蛋白聚糖等。这些成分不仅赋予了SIS良好的生物相容性和生物降解性，还能为细胞的黏附、增殖和分化提供适宜的微环境。同时，猪小肠黏膜下层来源广泛，成本相对较低，免疫原性较低，可用作多项诊疗中的器官移植用结构材料，特别是作为生物补片。在兽医眼科领域，猪小肠黏膜下层已被广泛应用于犬猫角膜重建手术，并取得了较好的临床效果。将脱细胞猪小肠黏膜下层用于构建组织工程角膜上皮，为解决角膜上皮重建治疗中供体材料短缺的问题提供了新的思路和方法。通过深入研究脱细胞猪小肠黏膜下层作为支架构建组织工程角膜上皮的可行性，有望开发出一种安全、有效的角膜上皮替代物，为角膜病患者带来新的希望，具有重要的临床意义和社会价值。

1.2研究目的与创新点

本研究旨在深入探究脱细胞猪小肠黏膜下层作为支架构建组织工程角膜上皮的可行性，为角膜上皮疾病的治疗提供新的策略和方法。通过一系列实验，全面评估脱细胞猪小肠黏膜下层的生物学特性，包括生物相容性、生物降解性、免疫原性等，明确其作为角膜上皮支架材料的优势和潜力。同时，研究种子细胞与脱细胞猪小肠黏膜下层支架的相互作用，优化构建工艺，提高组织工程角膜上皮的质量和性能。此外，通过体内外实验，验证构建的组织工程角膜上皮在修复角膜上皮损伤方面的有效性和安全性，为其临床应用奠定基础。

本研究的创新点主要体现在以下几个方面：在材料选择上，首次将脱细胞猪小肠黏膜下层应用于组织工程角膜上皮的构建，充分利用其独特的生物学特性和结构特点，为角膜上皮重建提供了一种全新的生物材料选择。在构建方法上，通过优化脱细胞处理工艺和种子细胞接种技术，提高了支架材料与种子细胞的相容性和细胞在支架上的黏附、增殖能力，从而提升了组织工程角膜上皮的构建效率和质量。在研究内容上，不仅关注组织工程角膜上皮的体外构建，还深入探讨了其在体内的应用效果和安全性，为临床转化提供了更全面的实验依据。

二、脱细胞猪小肠黏膜下层与组织工程角膜上皮概述

2.1脱细胞猪小肠黏膜下层

脱细胞猪小肠黏膜下层（SmallIntestinalSubmucosa，SIS），是从猪小肠组织中获取并经过一系列脱细胞处理后得到的细胞外基质材料。猪小肠作为来源，因其丰富的资源和相对稳定的供应，为SIS的制备提供了坚实的物质基础。在制备过程中，通过物理、化学或酶学等方法，去除小肠组织中的细胞成分，保留了完整的细胞外基质结构。

从组成结构来看，SIS主要由胶原蛋白构成，其中以I型和III型胶原为主，它们赋予了SIS良好的力学性能和结构稳定性。I型胶原作为主要成分，形成了坚韧的纤维网络，为组织提供强大的支撑力；III型胶原则在维持组织的弹性和柔韧性方面发挥重要作用。SIS还含有少量的V型和VI型胶原，这些不同类型的胶原蛋白相互交织，共同构建起复杂而有序的纤维结构，类似于人体组织中的细胞外基质架构，为细胞的附着和生长提供了理想的物理环境。除胶原蛋白外，SIS中还包含多种生物活性成