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靶向NAC1同源二聚体的小分子抑制剂NIC19：鉴定、机制与协同抗肿瘤新探

一、引言

1.1研究背景与意义

肿瘤作为严重威胁人类健康的重大疾病之一，一直是全球医学和生命科学领域研究的重点。尽管目前肿瘤治疗手段取得了显著进展，包括手术、放疗、化疗、靶向治疗和免疫治疗等多种方法，但肿瘤的复发、转移以及耐药性问题仍然是临床治疗面临的巨大挑战。据世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）发布的2020年全球最新癌症负担数据显示，全球癌症新发病例高达1929万例，死亡病例达996万例，且这一数字呈逐年上升趋势。这表明，当前肿瘤治疗现状仍不能满足临床需求，亟待开发新的治疗策略和药物靶点。

NAC1（NucleusAccumbens-1）作为一种新发现的促癌转录因子，近年来在肿瘤研究领域备受关注。研究表明，NAC1在多种肿瘤组织中呈现高表达，如乳腺癌、卵巢癌、结直肠癌等，且其表达水平与肿瘤的恶性进展、侵袭转移以及治疗抵抗密切相关。在三阴性乳腺癌中，较高的NAC1表达与肿瘤进展、干性和不良预后相关，其通过保持乳腺癌干细胞的特性并改变免疫系统对肿瘤的反应，帮助癌细胞扩散。在卵巢癌中，NAC1可促进肿瘤细胞在缺氧环境下的存活和糖酵解活性，对肿瘤的生长和发展起到关键作用。

NAC1蛋白的同源二聚体结构对其发挥生物学功能至关重要。研究发现，NAC1蛋白通过其特定结构域形成同源二聚体，这种二聚体结构能够稳定NAC1蛋白，并增强其与DNA的结合能力，从而调控下游一系列与肿瘤发生发展相关基因的表达。破坏NAC1同源二聚体的形成，能够有效降低NAC1蛋白的稳定性和活性，进而抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移等恶性行为。因此，靶向NAC1同源二聚体成为肿瘤治疗的一个极具潜力的新策略，有望为解决肿瘤治疗中的难题提供新的途径。

1.2国内外研究现状

在国外，对NAC1的研究起步较早，并且在NAC1的生物学功能和作用机制方面取得了一系列重要成果。研究人员发现NAC1在肿瘤干细胞的维持和肿瘤免疫逃逸中发挥关键作用，为肿瘤治疗靶点的选择提供了新的理论依据。同时，针对NAC1的小分子抑制剂的研究也在逐步开展，一些研究团队通过高通量筛选和计算机辅助药物设计等方法，试图寻找能够特异性靶向NAC1的小分子化合物，但目前尚未有临床应用的报道。

在国内，关于NAC1的研究也日益受到重视。众多科研团队对NAC1在不同肿瘤中的表达、功能及分子机制进行了深入探究，揭示了NAC1在肿瘤糖酵解、细胞周期调控以及上皮-间质转化等过程中的重要作用。在小分子抑制剂的研发方面，国内也取得了一些阶段性进展，如通过虚拟筛选和实验验证相结合的方式，发现了一些对NAC1具有潜在抑制作用的小分子先导化合物。然而，目前国内外对于靶向NAC1同源二聚体的小分子抑制剂的研究仍处于初级阶段，存在许多问题亟待解决。例如，已发现的小分子抑制剂大多活性较低、特异性不强，在体内的药代动力学性质和安全性也有待进一步评估。此外，对于小分子抑制剂与NAC1蛋白相互作用的分子机制以及其协同抗肿瘤作用的具体机制，也缺乏深入系统的研究。

1.3研究目的与内容

本研究旨在通过计算机辅助筛选和实验验证相结合的方法，鉴定出高效、特异性靶向NAC1同源二聚体的小分子抑制剂NIC19，并深入探究其协同抗肿瘤作用及其机制，为肿瘤治疗提供新的策略和药物先导化合物。具体研究内容如下：

NIC19的鉴定与筛选：基于NAC1蛋白同源二聚体结构，运用计算机辅助药物设计技术，从大量化合物库中进行虚拟筛选，获得潜在的小分子抑制剂。通过分子对接和动力学模拟等方法，分析小分子与NAC1蛋白的相互作用模式和结合稳定性，初步筛选出具有良好结合活性的小分子化合物。进一步通过细胞水平的实验，如蛋白质印迹法（WesternBlot）检测小分子对NAC1蛋白二聚体形成及表达稳定性的影响，验证并确定小分子抑制剂NIC19。

NIC19协同抗肿瘤作用的体外研究：采用多种肿瘤细胞系，如卵巢癌细胞系SKOV3、宫颈癌细胞系HeLa等，运用四甲基偶氮唑盐（MTT）法和克隆集落形成实验，检测NIC19与传统化疗药物（如顺铂、多柔比星）联合使用对肿瘤细胞增殖和克隆形成能力的影响。通过流式细胞术分析联合用药对肿瘤细胞周期分布和凋亡的影响，明确NIC19的协同抗肿瘤作用。利用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白（如cleaved-PARP、Bax、Bcl-2等）和细胞周期相关蛋白（如CyclinD1、p21等）的表达变化，初步探讨NIC19协同抗肿瘤作用的分子机制。

NIC19协同抗肿瘤作用的体内研究：建立裸鼠皮下肿瘤模型，将